詳細介紹
小鼠肺動脈內皮原代細胞
小鼠肺動脈內皮細胞分離自肺動脈組織;肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行。細胞呈單層多角形鋪路石狀分布;該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。肺動脈內皮細胞呈單層多角形鋪路石狀分布,該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
英文名稱 | Mouse Pulmonary Artery Endothelial Cells | 組織來源 | 肺動脈 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7787 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:小鼠肺動脈內皮細胞
組織來源:肺動脈
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:內皮細胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠肺動脈內皮細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的小鼠肺動脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的小鼠肺動脈內皮經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
胎兒表皮角化細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | 干擾素相關發育調節蛋白1抗體(生長因子誘導蛋白PC4) |
多核苷酸酸化酶蛋白抗體 | 隱花色素蛋白1抗體 |
慢性粒細胞白血病33抗體 | 原活化蛋白激酶3K10抗體 |
CD44V4抗體 | 肌Dystrobrevin β蛋白抗體 |
1號染色體開放閱讀框189抗體 | 轉錄因子HES4抗體 |
PDE4B Others Human 人 PDE4B / DPDE4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞) 5×106cells/瓶×2 人腸微血管內皮細胞HIMEC |
人表皮角質細胞-胎兒HEK-f | VIPR2 Others Human 人 VIPR2 / VPAC2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
RBP4 Others Human 人 RBP4 人細胞裂解液 (陽性對照) | ACPP Others Mouse 小鼠 Prostatic Acid Phosphatase / ACPP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HELF(人胚肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | PK(15)豬腎上皮細胞 PK (15) of porcine kidney epithelial cells MEM+10% FBS |
CM-M117小鼠視網膜muller細胞培養基100mL | 小鼠肺動脈內皮原代細胞原活化蛋白激酶3K10抗體 |
5637人膀胱癌細胞 5637 human bladder cancer cells 1640+10% FBS | 人脈絡叢內皮細胞裂解物HCPECL |
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells | OLR1 Others Rat 大鼠 OLR1 / LOX1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Hela(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0426RKO-E6(人結腸癌轉基因細胞)5×106cells/瓶×2 人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | 白介素2受體a鏈抗體 IL-2Ra |
酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體 | QGY-7701細胞,人肝癌細胞 人羊膜細胞,HA細胞 大鼠癌細胞;SHZ-88 |
乳腺癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2) | 酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 |
促代謝型谷受體2抗體 | PDE4B Others Human 人 PDE4B / DPDE4 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。