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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
普諾賽實驗室分離的小鼠肺大靜脈內皮采用-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
普諾賽實驗室分離的小鼠肺大靜脈內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 小鼠肺大靜脈內皮原代細胞 | 組織來源 | 肺靜脈組織 |
英文名稱 | Mouse Pulmonary Great Saphenous Vein Endothelial cells | 貨號 | YS-01X7060 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
小鼠肺大靜脈內皮細胞分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中，把動脈血由肺送回心臟的靜脈，是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對，共4條，兩條連接右肺，兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接，而與右心房或體靜脈系統連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓，是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下，肺循環具有血壓低、阻力小和順應性大的特點，肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力，要維持肺循環的低壓、低阻的狀態，必須保證整個肺循環系統的暢通無阻，血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈，再入左心室，經過左心室收縮進入體循環，才能避免肺動脈內壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列；該細胞在維持血管內外的動態平衡、合成和分泌細胞因子和介質、維持凝血和纖溶的動態平衡中起重要作用。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）或明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
CL-0038BRL(大鼠肝細胞)5×106cells/瓶×2 | 抗體 |
RhoC抗體 | 細胞骨架4.1蛋白家族DAL1抗體 |
0脂酸酸酶2結構域3抗體 | 蛋白激酶C結合蛋白NELL1抗體 |
膠質生長因子/調節蛋白β抗體 | 皮膚T細胞淋巴瘤相關抗原5抗體（腦膜瘤表達抗原6） |
鋅指蛋白471抗體 | 基膜聚糖蛋白抗體 |
CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 | KYSE30 人食管癌細胞 |
CL-0320BC3H1(小鼠腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | RN-c, 大鼠皮質元 |
間充質干細胞軟骨細胞分化培養基MCDM-prf | HAN(人羊膜細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CHO 中國倉鼠卵巢細胞 | CL-0212SK-Hep-1(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
HeLa細胞，人細胞 小鼠T淋巴細胞瘤細胞,Cyc-Tag(S49)細胞 原代平滑肌細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | 小鼠肺大靜脈內皮原代細胞蛋白激酶C結合蛋白NELL1抗體 |
肝星形細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | CL-0086GNM(人口腔鱗癌頸淋巴結轉移癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
HEC-1-B(人子宮內膜腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0418QGY-7703(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21 | Hela 299(人細胞) 5×106cells/瓶×2 |
MKN-45 低分化胃癌 | 四連接素TN抗體 |
肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（N端） | 人腎小管上皮細胞;HKC |
抑基因SSDP2抗體 | 白細胞細胞化學吸引素2抗體 |
可溶性蘋果酸脫氫酶抗體 | CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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