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詳細(xì)介紹
小鼠多巴胺神經(jīng)元原代細(xì)胞
小鼠多巴胺元細(xì)胞分離腦組織；多巴胺元，即：胺能元，主要指含多巴胺的元，其細(xì)胞體主要分布在黑質(zhì)、腳間核和丘腦下部等處。在這些區(qū)域多巴胺含量很高。多巴胺在機(jī)體內(nèi)合成時(shí)以酪為原料。腦內(nèi)的多巴胺主要是由黑質(zhì)細(xì)胞來合成，這些多巴胺參與錐體外系統(tǒng)的活動(dòng)，與軀體運(yùn)動(dòng)機(jī)能有密切關(guān)系。腦內(nèi)多巴胺代謝失常時(shí)，可引起震顫性麻痹(帕金森震顫)。多巴胺(Dopamine)，是NA的前體物質(zhì)，是下丘腦和腦垂體腺中的一種關(guān)鍵遞質(zhì)，中樞系統(tǒng)中多巴胺的濃度受精神因素的影響，末梢的GnRH和多巴胺間存在著軸突聯(lián)系并相互作用，以及多巴胺有抑制GnRH分泌的作用。中腦的原物質(zhì)多巴胺(Dopamine)，則直接影響人們的情緒。從理論上來看，增加這種物質(zhì)，就能讓人興奮，但是它會(huì)令人上癮。多巴胺在前腦和基底節(jié)(Basal Ganglia)出現(xiàn)，基底節(jié)負(fù)責(zé)處理恐懼的情緒，但由于多巴胺的緣故，取代了恐懼的感覺，因此有很多人的上癮行為，都是因多巴胺而起的。
英文名稱 | Mouse Dopamine Neuron Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7617 |
細(xì)胞形態(tài) | 元細(xì)胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：小鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞
組織來源：腦組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠多巴胺元采用消化法、元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠多巴胺元經(jīng)TH免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 整聯(lián)蛋白重復(fù)蛋白3抗體 |
PELO蛋白抗體 | 表皮生長因子樣蛋白1抗體 |
免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體 | 擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 |
8號(hào)染色體開放閱讀框59抗體 | D酪激酶衰減蛋白1抗體 |
1號(hào)染色體開放閱讀框198抗體 | 保護(hù)肽HN抗體 |
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | PCSK1 Others Human 人 PCSK1 / NEC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
人腸平滑肌細(xì)胞cDNAHISMC cDNA | SIRPA Others Rat 大鼠 SIRP alpha / CD172a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
A549(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R003大鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL 人浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細(xì)胞;CCD-1095Sk | IL2RB Others Canine 狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
KLK11 Others Human 人 KLK11 / Kallikrein-11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | HCF Pellet 人類心臟成纖維細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞裂解物HA-h L |
CM-M130小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL | 小鼠多巴胺神經(jīng)元原代細(xì)胞擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 |
PRSS2 Others Mouse 小鼠 PRSS2 / y2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | 犬腎細(xì)胞;MDCK(NBL-2) |
SERPINA12 Protein Human 重組人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S2 癌細(xì)胞，Bcap-37細(xì)胞 Hce-8693(盲腸腺癌細(xì)胞(未分化)) |
HGF Others Cynomolgus 食蟹猴 HGF / Hepatocyte Growth Factor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) | CD36抗體 |
酸化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1抗體 | CD86 Others Human 人 CD86 / B7-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 | 2型纖維瘤抗體 |
G蛋白修補(bǔ)結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 | CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
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