詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔卵泡顆粒采用先機械分離,而后膠原酶消化,后差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔卵泡顆粒經FSHR免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔卵泡顆粒原代細胞 | 組織來源 | 卵巢 |
英文名稱 | Rabbit Follicle Granulosa Cells | 貨號 | YS-01X8389 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔卵泡顆粒細胞(卵巢顆粒細胞)分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內的大細胞群,也是主要的功能細胞,卵泡發育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖,而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起,尤其在卵泡發育后期,此外,顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成,維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環境。細胞形狀呈圓形或橢圓形。
培養信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔卵泡顆粒細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品:
小鼠漿細胞瘤;MPC-11 | FAM102B蛋白抗體 |
富含GC啟動子結合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體 | 溶血0脂?;D移酶抗體 |
細胞分裂周期蛋白16抗體 | 7抗體 |
γ氨基轉氨酶抗體 | FAM102B蛋白抗體 |
7抗體 | 溶血0脂?;D移酶抗體 |
PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照) | 穩定表達EBNA1的人胚腎細胞;293E 人腎皮層上皮細胞培養基 100mL |
人股骨成骨細胞HO-f | VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道病毒71型 VP0 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
BMPR1A Others Human 人 BMPRIA / ALK-3 / CD292 人細胞裂解液 (陽性對照) | PTH Others Human 人 PTH / PTH1 / Parathyroid Hormone 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD34 Others Human 人 CD34 人細胞裂解液 (陽性對照) | 長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞 Ranca細胞,小鼠腎癌細胞 |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0911 | 兔卵泡顆粒原代細胞7抗體 |
人導管癌細胞;ZR-75-30 大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞培養基 100mL | 人浸潤性導管癌旁皮膚細胞;CCD-1095Sk |
22RV1 人前列腺癌細胞 | SHPK Others Human 人 CARKL / SHPK 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體 |
γ氨基轉氨酶抗體 | 小鼠子細胞;U14 小鼠肝竇內皮細胞培養基 100mL |
富含GC啟動子結合蛋白1/血管壁相連蛋白抗體 | 細胞分裂周期蛋白16抗體 |
酸化DNA損傷修復基因XRCC9抗體 | PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。