詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:
方法簡介
實驗室分離的兔淋巴結淋巴采用分離淋巴結組織、研磨獲取單細胞懸液后通過密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為1×106cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔淋巴結淋巴經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔淋巴結淋巴原代細胞 | 組織來源 | 淋巴結 |
英文名稱 | Rabbit Lymph Node Lymphocyte Cells | 貨號 | YS-01X8382 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介:
兔淋巴結淋巴細胞分離自淋巴結;淋巴結是哺乳類的周圍淋巴器官,由淋巴細胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行進途中,是產生免疫應答的重要器官之一。淋巴結表面包有被膜,被膜的結締組織伸入淋巴結內形成小梁,構成淋巴結的支架。被膜下為皮質區,淋巴結的中心及門部為髓質區。皮質區有淋巴小結、彌散淋巴組織和皮質淋巴竇(簡稱皮竇),髓質包括由致密淋巴組織構成的髓索和髓質淋巴竇(簡稱髓竇)。淋巴竇的竇腔內有許多淋巴細胞和巨噬細胞,從輸入淋巴管流來的淋巴液先進入皮竇再流向髓竇,后經輸出淋巴管離開淋巴結。淋巴結的主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應。淋巴結腫大或疼痛常表示其屬區范圍內的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液,產生淋巴細胞和漿細胞,參與機體的免疫反應;當局部感染時,細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴結淋巴細胞是白細胞的一種,由次級淋巴器官淋巴結產生,是機體免疫應答功能的重要細胞成分;細胞為圓形細胞核,細胞質少。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發揮其免疫功能。
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:懸浮
細胞形態:圓形
傳代特性:不增殖;不傳代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔淋巴結淋巴細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法:
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品:
小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929] | FRMD8蛋白抗體 |
G蛋白偶聯受體7抗體 | 酸化APS抗體 |
ADP核糖基化因子3抗體 | Fas死亡結構域相關蛋白 |
ABI基因家族成員3結合蛋白抗體 | FRMD8蛋白抗體 |
Fas死亡結構域相關蛋白 | 酸化APS抗體 |
人少突膠質前體細胞(HOPC)(貼壁生長) | AGER Others Human 人 AGER / RAGE 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人骨骼肌成肌細胞總RNAHSkMM NA | HSPA1A Others Human 人 HSP70 / HSPA1A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HIC(人小腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠干細胞(EGFP標記) 人胚胎,皮膚,肌肉;M-22 | PDCD1LG2 Others Cynomolgus 食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 人細胞裂解液 (陽性對照) |
5E Others Human 人 5E / CD73 人細胞裂解液 (陽性對照) | TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0922 | 兔淋巴結淋巴原代細胞Fas死亡結構域相關蛋白 |
KB(人口腔表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人肝內膽管上皮細胞培養基 100mL |
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞 | hFOB 1.19細胞,人SV40轉染成骨細胞 人癌細胞(耐阿),MCF-7/ADR細胞 小鼠小腦星形膠質細胞MA-c |
KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人細胞裂解液 (陽性對照) | 細胞外基質蛋白FRAS1抗體 |
ABI基因家族成員3結合蛋白抗體 | HA Others H16N3 甲型流感 H16N3 (A/black-headed gull/Sweden/5/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
G蛋白偶聯受體7抗體 | ADP核糖基化因子3抗體 |
細胞外基質蛋白FRAS1抗體 | 人少突膠質前體細胞(HOPC)(貼壁生長) |