化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
兔關(guān)節(jié)囊成纖維原代細胞
兔關(guān)節(jié)囊成纖維細胞分離自關(guān)節(jié)囊組織；關(guān)節(jié)囊（articular capsule）是由結(jié)締組織構(gòu)成的膜囊，附著于關(guān)節(jié)的周圍，密封關(guān)節(jié)腔。關(guān)節(jié)囊的壁共有兩層：外層為纖維層；內(nèi)層為滑膜層。纖維層實際上是一個連結(jié)骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅韌，由致密結(jié)締組織構(gòu)成，含有豐富的血管和。其淺層纖維多呈縱行排列；深層纖維主要為環(huán)行纖維。纖維層的厚薄，各個關(guān)節(jié)不相同，即是在同一關(guān)節(jié)中，各部也不一致一般在運動范圍小的或是負重較大的關(guān)節(jié)中，都較厚而緊張，相反，于運動靈活的關(guān)節(jié)，則較薄而松弛。有的關(guān)節(jié)囊的部分纖維囊缺如，僅一層滑膜層；有的部分明顯增厚，形成韌帶。滑膜層薄而柔潤，是由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，襯在纖維層內(nèi)面，周緣附著在關(guān)節(jié)軟骨的邊緣。它朝向關(guān)節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮，此面上蓋有一層內(nèi)皮細胞。滑膜向關(guān)節(jié)腔分泌滑液，滑液是稍粘稠而透明的液體，可減少關(guān)節(jié)中相連骨的摩擦，是一種滑潤劑。滑膜表面可形成絨毛或皺襞突入關(guān)節(jié)腔內(nèi)。有時滑膜層可以穿過纖維層呈囊狀向外膨出，形成滑膜囊，常位于肌腱與骨面之間。有時滑膜層突出不明顯，僅呈深窩狀，稱為囊狀隱窩。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Rabbit Articular Capsule Fibroblast Cells | 組織來源 | 關(guān)節(jié)囊 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8362 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔關(guān)節(jié)囊成纖維細胞
組織來源：關(guān)節(jié)囊
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔關(guān)節(jié)囊成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實驗室分離的兔關(guān)節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔關(guān)節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
小鼠胚胎成纖維細胞;MEF | Gzms-A ELISA Kit 大鼠顆粒酶AMulti-class antibodies規(guī)格： 48T |
CXCR7： 細胞表面趨化因子受體7抗體 0.1ml | GYPB： 血型糖蛋白δ抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CDMP1/GDF5 軟骨衍生形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | PRRSV： 豬藍耳病病毒抗體 1ml |
Anti-NR2A/NMDAR2A/FITC 熒光素標記谷受體2A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | EV71(Human enterovirus 71)VP1(CT) 腸道病毒71型/手足口病病毒抗原(C端) 0.5mg |
IgM/Gold 金標記兔抗羊IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MCSF： 巨噬細胞克隆刺激因子抗體 0.1ml |
MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細胞裂解液 (陽性對照) | STO(小鼠胚成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IL18RAP / IL1R7 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人虹膜色素上皮細胞HIPEpiC | EDA2R Others Rat 大鼠 XEDAR / EDA2R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HPX Others Human 人 HPX / Hemopexin 人細胞裂解液 (陽性對照) | CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
ERBB3 Others Human 人 ErbB3 / HER3 人細胞裂解液 (陽性對照) | 鼬肺上皮細胞;MV-1-Lu 胰腺癌細胞，PANC-1細胞 3T3 clone A31細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 |
EC109，人食管癌細胞 | 兔關(guān)節(jié)囊成纖維原代細胞PRRSV： 豬藍耳病病毒抗體 1ml |
HuT 78人T淋巴細胞白血病細胞 HuT 78 human T lymphocyte leukemia cell IMDM培養(yǎng)基+20%FBS | 人結(jié)直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15] |
大鼠支氣管成纖維細胞培養(yǎng)基 100mL | NMNAT2 Others Human 人 NMNAT2 / NMNAT-2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-27R/TCCR/FITC 熒光素標記白細胞介素27受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Shrimp tropomyosin 南美白對蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | TE-1細胞，食管癌細胞 人食管癌細胞,EC97076細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-C |
Rhesus antibody Rh Phospho-GRM2/GLUR2(Tyr876) 0酸化促代謝型谷受體2抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KIF17 驅(qū)動蛋白家族KIF17抗體 規(guī)格 0.2ml |
BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴細胞趨化因子 96T | MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)