詳細介紹
兔骨內膜間充質干原代細胞
兔骨內膜間充質干細胞分離自股骨、脛骨;骨內膜是一層致密結締組織膜,覆蓋在骨的表面(關節面除外),新鮮骨內膜呈粉紅色,含有豐富的血管、和成骨細胞。此外,附著于骨的肌腱、韌帶于附著部位都與骨內膜編織在一起。因而骨內膜與骨質結合甚為牢固。骨內膜富含血管、,通過骨質的滋養孔分布于骨質和骨髓。骨內膜分內、外兩層,外層主要是粗大的膠原纖維束,部分纖維穿入骨質,使骨內膜固定于骨面;內層疏松,含成骨細胞和破骨細胞(分別具有產生新骨質和改建骨的功能)。骨髓腔和骨松質的網眼也襯著一層菲薄的結締組織膜,叫做骨膜。骨內膜的內層和骨膜有分化成骨細胞和破骨細胞的能力,以形成新骨質和破壞、改造已生成的骨質,所以對骨的發生、生長、修復等具有重要意義。骨內膜間充質干細胞是一種具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細胞。骨內膜間充質干細胞的體外培養條件要求較高,在培養過程中,受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養溫度和培養基pH值等條件的影響。
英文名稱 | Rabbit Endosteal Mesenchymal Stem Cells | 組織來源 | 股骨、脛骨 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7064 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:兔骨內膜間充質干細胞
組織來源:股骨、脛骨
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔骨內膜間充質干采用沖洗骨髓、消化骨內膜、差速貼壁法結合培養基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的兔骨內膜間充質干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
BALL-1人B淋巴細胞急性白血病細胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清 | Rhesus antibody Rh GDF9 生長分化因子9抗體 規格 0.1ml |
MUC7(Human Mucin-7) ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素7Multi-class antibodies規格: 48T | IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗IgG 0.1ml |
IKIP: IKK激酶相互作用蛋白抗體 0.2ml | DHEA-S(Mouse Dehydroepiandrosterone sulfate)ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮酯 96T |
Rhesus antibody Rh Repetin 中間絲相關蛋白抗體 規格 0.2ml | Anti-Leptin/FITC 熒光素FITC標記瘦素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-Stathmin 1 (Ser63) 0酸化原癌基因蛋白18抗體 規格 0.1ml | BLAP ELISA Kit(Rabbit) 兔骨堿性0酸酶 ELISA 試劑盒 96T |
EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標簽) | 牛胚氣管細胞;EB (NBL-4) |
A172細胞,膠質母細胞瘤細胞 肝細胞癌,HepG2細胞 人結直腸腺癌細胞;COLO 205 | 小鼠肉瘤瘤株;S180 |
人胚腎上皮細胞系;KiMA | LS 180(人結腸腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠胰腺上皮細胞培養基 100mL | 小鼠小腸隱窩上皮細胞培養基 100mL |
KP-N-NS細胞,人腎上腺母細胞瘤細胞(腦轉移) 小鼠骨髓瘤細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 CL-0397NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 兔骨內膜間充質干原代細胞DHEA-S(Mouse Dehydroepiandrosterone sulfate)ELISA Kit 小鼠脫氫表雄酮酯 96T |
胎兒真皮成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | CDNF Others Mouse 小鼠 CDNF / ARMETL1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H100胎兒表皮角化細胞培養基100mL |
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA | Rhesus antibody Rh APC/Adenomatous Polyposis Coli 腺瘤樣息肉抗體 規格 0.1ml |
beta B1 Crystallin: β晶體蛋白B1抗體 0.2ml | 非洲綠猴腎細胞;VERO |
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標記0酸化SMAD抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | PDLIM3: 輔肌動蛋白相關LIM蛋白抗體 0.1ml |
Anti-CDK5/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶5抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標簽) |