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磷酸肌醇(PA)是細胞中許多脂質生物合成的關鍵前體。PA在細胞膜結構中發揮著關鍵作用,并作為一種信號脂質,將細胞質中的蛋白質招募到細胞膜上。在細胞內,PA的濃度通過強效磷脂磷酸酶的活性維持在極低水平,這些酶將磷酸肌醇轉化為二酰基甘油(DAG)。由于DAG也是一種重要的脂質前體,它也會迅速代謝為其他膜脂質成分(例如,磷脂酰膽堿、磷脂酰絲氨酸、磷脂酰乙醇胺)。最終,測量細胞中的PA對于監測脂質的合成和代謝是非常有用的。
Cell Biolabs的總磷酸肌醇測定試劑盒通過耦聯酶反應系統測量樣本中的總磷酸肌醇含量,包括溶血磷酸肌醇(LPA)。首先,使用脂肪酶將樣本中的磷酸肌醇水解為甘油-3-磷酸。接下來,甘油-3-磷酸在甘油-3-磷酸氧化酶(GPO)的作用下被氧化,產生過氧化氫,過氧化氫與試劑盒中的熒光探針(激發波長530-560 nm/發射波長585-59 nm5)發生反應。
總磷酸肌醇測定試劑盒是一種簡單的熒光法測定方法,采用96孔微孔板格式定量測量樣本中的總PA(PA和LPA)。每套試劑盒提供的試劑足以進行多達100次測定,包括空白、標準品和未知樣本。試劑盒包含L-α-磷酸肌醇標準品,檢測靈敏度限約為5 ?M。
注意: 本試劑盒不適用于尿液、血漿或血清樣本。
作為Cell Biolabs全國總代理,艾美捷科技強烈推薦Cell Biolabs銷售產品總磷脂酸檢測試劑盒。產品僅用于科研,不可用于臨床診斷。
產品名稱 | 貨號 | 詳情 |
總磷脂酸檢測試劑盒 | MET-5019 | 查看 |
試劑盒組成:
磷酸肌醇標準品(部件號50191D):一瓶200 ?L的1 mM L-α-磷酸肌醇。
10X測定緩沖液(部件號50192D):一瓶1.5 mL。
脂肪酶溶液(部件號50193D):三瓶1.4 mL。
酶混合液(部件號50194D):三瓶1.75 mL。
熒光探針(部件號261901):一瓶110 ?L的琥珀色瓶。
未提供材料:
標準96孔熒光黑色微孔板
含鎂和鈣的PBS
細胞脂質提取試劑(甲醇、氯仿、1M氯化鈉)
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儲存:
將整個試劑盒儲存于-80℃。通過分裝避免多次凍融。熒光探針對光敏感,應保存在琥珀色試管中。
Cell Biolabs公司位于美國加利福尼亞州南部重要的工業城市圣迭戈(San Diego),是有名的細胞學試劑品牌,作為前沿的細胞學分析檢測試劑盒生產商,為生物技術和研究類客戶提供好的基于細胞功能研究以及疾病等方面的g端產品和技術服務。產品主要涵蓋細胞研究、細胞信號通路和蛋白質生物學、代謝研究、病原體和毒素、干細胞研究等領域。全球眾多大學、政府研究機構、生物、制藥企業的科研實驗室均在使用Cell Biolabs的產品。
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