IgG檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于測量馬生物樣品中的IgG。如果ELISA在預期用途之外使用，用戶可能需要優化saiduse。

作為Biogradetech-d家代理，艾美捷科技強烈推薦Biogradetech銷售產品IgG (馬) ELISA試劑盒。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

IgG (馬) ELISA試劑盒：

更多信息

抗體類型 ELISA

宿主 山羊

特異性/目標 IgG h+l

大小 1.0

檢測范圍 6.25 ng/ml - 400 ng/ml

靈敏度 2.217 ng/ml

檢測時間 60分鐘

樣本類型 牛奶、血漿、血清

儲存條件2-8攝氏度

檢測原理：

雙抗體夾心ELISA的原理如圖1所示。在這種測定中，樣品中存在的IgG與抗IgG抗體反應，抗IgG抗體已吸附在聚苯乙烯微量滴定池的表面。在通過洗滌去除未結合的蛋白質后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）綴合的抗IgG抗體。這些酶標記的抗體與先前結合的IgG形成復合物。在另一個洗滌步驟之后，通過添加無色底物3，3’，5，5’-四甲基聯苯胺（TMB）來測定與免疫吸附結合的酶。結合酶的數量與所測試樣品中IgG的濃度直接相關；因此，在450nm處的吸光度是測試樣品中IgG濃度的測量值。測試樣品中IgG的量可以根據標準曲線進行插值，并根據樣品稀釋度進行校正。

試劑準備：

- 使用前將所有試劑恢復至室溫（16°C至25°C）。

- 稀釋液濃縮液 - 所提供的稀釋液是5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1部分緩沖液濃縮液，4部分dH2O）稀釋1/5。

- 洗滌液濃縮液 - 所提供的洗滌液是20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1部分緩沖液濃縮液，19部分dH2O）稀釋1/20。在低溫儲存時濃縮液中可能會出現結晶。在稀釋前將濃縮液加熱至30-35°C可以溶解結晶。

- 酶-抗體結合物 - 根據每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量，向每個測試條使用的990 ?L 1X稀釋液中添加10 ?L酶-抗體結合物。使用前立即稀釋，并避免光照。均勻混合，但要輕柔。避免產生泡沫。

- 預涂層ELISA微孔板 - 按提供的狀態準備使用。揭開鋁箔袋，從袋中取出板。移除在測試中不會使用的條和孔，并將它們連同干燥劑一起重新封入袋中。

- 馬IgG校準物 - 根據批次特定的分析證書準備。

檢測程序：

1. 所有樣品和標準品應以雙份進行檢測。

2. 標準品和測試樣品應盡快裝入ELISA孔中，以避免OD讀數的變化。使用多通道移液管可以減少這種情況的發生。

- 準確移液100 μL標準品0（0.0 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品1（6.25 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品2（12.50 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品3（25 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品4（50 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品5（100 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品6（200 ng/mL）兩份

- 準確移液100 μL標準品7（400 ng/mL）兩份

3. 將100 μL樣品（兩份）移液到預先z定的孔中。

4. 在室溫下孵育微孔板三十（30 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋好并保持水平。

5. 孵育后，吸出孔中的內容物。

6. 用適當稀釋的洗滌液w全填充每個孔并吸出。重復三次，總共四次洗滌。如果手動洗滌：用洗滌緩沖液w全填充孔，然后將板倒置，將內容物倒/搖出到廢物容器中。隨后將孔在吸水紙上用力敲擊以去除殘留緩沖液。重復三次，總共四次洗滌。

7. 向每個孔中準確移液100 μL適當稀釋的酶-抗體結合物。在室溫下孵育二十（20 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋好，置于暗處并保持水平。

8. 如步驟5/6所述洗滌并吸干孔。

9. 向每個孔中準確移液100 μL TMB底物溶液。

10. 在暗處室溫下精確孵育十分鐘（10）。

11. 十分鐘后，向每個孔中添加100 μL終止溶液。

12. 在30分鐘內測定每個孔中內容物的吸光度（450 nm）。根據制造商的規格校準板閱讀器。

Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。

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