Exosome（外泌體）是由活細(xì)胞分泌的直徑約為30-150 nm的小囊泡，具有典型的脂質(zhì)雙分子層結(jié)構(gòu)；存在于細(xì)胞培養(yǎng)上清液、血清、血漿、唾液、尿液、羊水以及其它生物體液中；Exosome攜帶有多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息，不僅在細(xì)胞與細(xì)胞間的物質(zhì)和信息傳遞中起重要作用，更有望成為多種疾病的早期診斷標(biāo)志物。

本試劑盒基于自主研發(fā)的磁珠，可在不吸附雜質(zhì)的情況下特異性捕獲外泌體，實現(xiàn)外泌體分離的高純度和高回收率。它具有操作簡單、純度高、回收率高的優(yōu)點(diǎn)，特別適合于從血漿和血清中分離外泌體。隔離的外泌體可用于WB分析、NTA或納米流粒度分析、電子顯微鏡檢測、組學(xué)研究、細(xì)胞和動物功能研究等等。

艾美捷血漿/血清外泌體提取試劑盒：

目錄號：A-EXO006

尺寸：50T

儲存：收到后，按照儲存說明儲存套件組件。保質(zhì)期為12月。

血漿/血清外泌體提取試劑盒組成：

套件組件尺寸               規(guī)格（50T）            儲存條件

ExoMag Exosome珠子        500 mg                  4℃

洗脫緩沖液                 5 mL                   室溫

溶液A                     2x125 mL                4℃

樣品預(yù)處理：

1. 細(xì)胞去除：將樣品在4℃下以300 g的速度離心5分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。對于無細(xì)胞的樣品，可以跳過這一步驟。

2. 細(xì)胞和細(xì)胞碎片去除：將樣品在4℃下以2000 g的速度離心10分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。

3. 大顆粒物去除：將從步驟2獲得的上清液在4℃下以14000 g的速度離心30分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。

富集外泌體：

1. 取500 μL預(yù)處理后的樣品（如果處理的樣品體積低于500 μL，只需使用溶液A將樣品體積補(bǔ)至500 μL），加入10 mg（±10%變異）的ExoMag外泌體磁珠到一個1.5 mL的離心管中。將離心管固定在平臺搖床上，在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。

2. 將上述離心管放在磁分離架上，靜置5秒鐘，倒掉上清液。

3. 加入1 mL溶液A，通過倒置離心管混合，將其放在磁分離架上靜置5秒鐘，倒掉上清液。

4. 重復(fù)步驟3兩次，保留ExoMag外泌體磁珠。

分離外泌體：

1. 向ExoMag外泌體磁珠中加入100 μL洗脫緩沖液，渦旋30秒鐘。將離心管固定在平臺搖床上，在室溫下以17 rpm的速度孵育30分鐘。

2. 將離心管放在磁分離架上，靜置5秒鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到一個新的1.5 mL離心管中。這個上清液中含有外泌體。

外泌體不應(yīng)長時間存放在洗脫緩沖液中。如果需要長期存儲，請使用超濾管（分子量截留率10 kDa）用PBS溶液替換洗脫緩沖液。

注意事項：

1、使用前請將外泌體抽提試劑（41202-A）充分混勻。

2、產(chǎn)品只針對血清/血漿樣本，不適用其它體液或者是細(xì)胞培養(yǎng)上清中外泌體的抽提；如果需要進(jìn)行細(xì)胞上清外泌體分離，請選用細(xì)胞培養(yǎng)上清外泌體快速抽提試劑盒。

3、如果想要進(jìn)一步純化外泌體，可以使用相應(yīng)抗體包被的磁珠進(jìn)行親和純化。

4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。