細(xì)胞衰老是細(xì)胞停止分裂的現(xiàn)象。衰老可由內(nèi)部（氧化應(yīng)激、DNA損傷等）和外部（毒素、紫外線等）因素誘導(dǎo)。衰老是一種生長停滯的狀態(tài)，細(xì)胞在這種狀態(tài)下保持活力但停止分裂。衰老細(xì)胞表現(xiàn)出細(xì)胞大小增加，β-半乳糖苷酶、p53和P16活性的衰老相關(guān)表達(dá)，以及基因表達(dá)模式的改變。

AkrivisBio 的衰老檢測試劑盒旨在檢測β-Gal活性。β-Gal主要存在于衰老細(xì)胞中，但在正常表達(dá)β-Gal的細(xì)胞（如成熟巨噬細(xì)胞）中可能出現(xiàn)假陽性。

艾美捷AkrivisBio 細(xì)胞衰老染色試劑盒：

Catalog：COS-0102

Size: Includes reagents for staining 24-, 12-, 6- well plates

Sample Type：Cultured Adherent Cells

Species：All

Method of Detection：Light Microscopy

Assay Type：Qualitative

Application：To detect β-Gal activity in senescent cells under a light  microscope.

Storage Conditions：4°C

Shipping Temperature：Gel Pack

Shelf Life：One year from the date of delivery

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目錄：COS-0102

尺寸：包括用于染色24、12、6孔板的試劑

樣品類型：培養(yǎng)的粘附細(xì)胞

物種：全部

檢測方法：光學(xué)顯微鏡

化驗(yàn)類型：定性

應(yīng)用：在光學(xué)顯微鏡下檢測衰老細(xì)胞中β-Gal的活性。

儲存條件：將試劑盒儲存在4°C溫度下。溶解X-gal后，將溶液儲存在-20°C，避光。

運(yùn)輸溫度：凝膠包裝

保質(zhì)期：一年

AkrivisBio 細(xì)胞衰老染色試劑盒組成：

固定液125 ml NM COS-0102-A

X-Gal（150 mg，凍干）1小瓶綠色COS-0102-B

含液125 ml WM COS-0102-C

含補(bǔ)充劑1.5 ml紅色COS-0102-D

-以下協(xié)議是為12孔板中的每個(gè)孔設(shè)計(jì)的。如果使用不同的板，則相應(yīng)地調(diào)整體積（例如，對于6孔板，將體積加倍，對于24孔板，將體積減半）。

-制備PBS溶液（未提供）。每孔3毫升。

-X-gal溶液：X-gal具有吸濕性。在打開小瓶之前，讓其達(dá)到室溫30分鐘。稱取20 mg X-gal至琥珀色或鋁箔包裹的管，加入1ml N，N-二甲基甲酰胺，制備20X儲備溶液。未使用的X-gal溶液可以在–20°C（避光）下儲存1-2個(gè)月。始終使用裝有X-gal溶液的聚丙烯或玻璃容器。請勿使用聚苯乙烯。

-固定液、染色液和染色補(bǔ)充劑（100X）可在4°C下儲存。

-如果使用染色溶液或染色補(bǔ)充液發(fā)生沉淀，將溶液加熱至37°C，使沉淀物重新溶解。如果沉淀仍然存在，離心小瓶并使用上清液。

衰老檢測：

1.通過在孔邊緣抽吸從孔中取出培養(yǎng)基，并用1ml PBS洗滌細(xì)胞一次。

2.在室溫下用0.5ml固定液固定細(xì)胞10-15分鐘。細(xì)胞固定時(shí)準(zhǔn)備染色。準(zhǔn)備充分要染色的孔數(shù)的溶液。對于每口井，準(zhǔn)備：染色溶液470µl染色補(bǔ)充劑5µlX-gal在25µl DMF中

3.用1ml PBS洗滌細(xì)胞兩次。

4.向每個(gè)孔中加入0.5 ml的染色溶液混合物。蓋住盤子。在37°C下培養(yǎng)過夜。

5.在顯微鏡下觀察細(xì)胞是否出現(xiàn)藍(lán)色（40–400 X）。

6.對于染色板的長期儲存，去除染色溶液并向細(xì)胞中添加70%甘油。在4°C下儲存。

艾美捷科技是AkrivisBio的中國代理商，為科研工作者提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品與服務(wù)。