概述:
蛋白質由氨基酸組成,是自然界中發現的最復雜的有機化合物之一。由鹽酸和蛋白酶分解成易被高等動物的腸道和微生物有機體的細胞膜吸收的氨基酸包括人類在內的每種動物,必須要有足夠的蛋自質來維持自身生長,來生成每個細胞所必需的氫基酸,一些特種蛋自質還是某些特殊細胞、腺體分泌物、度和激素的功能性組成元素蛋白酶是指一些有催化功能的酶,能夠水解(斷裂)蛋白質,也稱為蛋白水解酶。蛋白水解酶在許多生理和病理過程中發揮重要作用,在食品和乳品加工業也有著廣泛應用。
工作機理:
蛋白水解酶制劑能在中性條件下水解蛋白質食品中的縮氨酸鍵,釋放氨基酸或者多肽。在酒精、葡萄酒、果汁、啤酒、黃油和醬油生產中,添加中性蛋白酶可澄清發酵液中的霧氣。酵母在發酵階段的生長可以通過懸浮蛋白質轉化的氨基酸來加以促進,從而加速發酵并提高產量;
艾美捷中性蛋白酶(Dispase®)是一種非哺乳動物來源的無(AOF)金屬中性蛋白酶,通過沃辛頓開發的方法純化。其溫和的蛋白水解作用使該酶特別適用于原代細胞和二次(亞培養)細胞培養的制備,因為它對細胞膜溫和。這種蛋白酶還用作細胞分離和組織解離應用中的二級酶,通常與膠原蛋白一起使用。
中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)組成
已知該酶每g摩爾純化酶含有1g原子的鋅。如果通過EDTA或EGTA等螯合劑去除這種鋅成分,則會獲得無活性的載脂酶。鈣已在純化的蛋白質中檢測到,并被認為在維持結構和構型以及防止自溶方面發揮作用(Griffin and Fogarty 1973 and Alvarez 2006)。
分子特性
中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)由細胞外中性蛋白酶基因npr(GenBank入庫號BAA00734)產生,該基因與枯草芽孢桿菌具有62%的同一性(Koide等人,1986)。存在單個 978 bp 開放閱讀框,并且前序列的存在對于桿菌的所有分泌蛋白酶都是常見的。(竹川等人,1991年)。從Asn-287到Gly-590的Npr序列與中性蛋白酶序列具有相當大的同源性,例如來自熱蛋白水解芽孢桿菌的熱溶酶(55%相同)。
中性蛋白酶(分散酶)(WBC-LS02112)的應用
組織分解和轉代培養
防止不必要的細胞聚集
培養細胞的制備
從真皮中分離完整的表皮,從基質培養中分離完整的上皮片(Kurt等人,1989)
正常、二倍體細胞和細胞系的收獲和轉移(Matsumura 等人,1975 年)
溫和而完整的表皮細胞分離(北野和岡田1983)
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