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乳鐵蛋白(LF)是一種具有抗菌活性的多功能鐵結(jié)合蛋白。它存在于牛奶和其他粘膜中分泌物。乳鐵蛋白是抵抗感染和炎癥的先天防御的一部分,也具有功能調(diào)節(jié)鐵吸收。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA是一種高度靈敏的雙位點酶聯(lián)免疫測定(ELISA)人類生物樣品中乳鐵蛋白的測定。僅供研究使用。不用于診斷程序。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA試劑盒試劑制備:
1.濃縮稀釋劑
提供的稀釋劑溶液為5倍濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:5。
2.濃縮洗滌液
提供的洗滌液為20X濃縮液,必須用蒸餾水或去離子水稀釋1:20。結(jié)晶當(dāng)儲存溫度較低時,精礦中的形成并不罕見。濃縮液加溫稀釋前30-35°C可溶解晶體。
3.酶抗體結(jié)合物濃縮物
通過添加10µL計算每個微量滴定板測試條所需的工作標記溶液量酶抗體綴合物至990µL或1X稀釋劑,用于每個測試條。立即稀釋在使用前,并防止光線照射。混合均勻,但要輕柔。避免起泡。
4.TMB基板溶液
隨附隨用。
5.微量滴定板
隨附隨用。打開微量滴定袋并從袋中取出板。移除所有將不用于分析,將其放回袋中,并與干燥劑一起重新密封。
6.人乳鐵蛋白校準儀
將1.0 ml蒸餾水或去離子水加入凍干人乳鐵蛋白校準儀中,并輕輕混合直至溶解。校準器現(xiàn)在的濃度為18.40µg/mL(重新配制的校準器應(yīng)為如果打算將來使用,則立即冷凍)。需要準備人乳鐵蛋白校準品使用前立即(見下表)。在每一步之間充分混合。避免起泡。
艾美捷Kamiya人乳鐵蛋白ELISA試劑盒化驗規(guī)程:
樣品的稀釋:
由于測定的高靈敏度,在用于正常測定之前,應(yīng)稀釋每個樣品。A 1:20血清或血漿稀釋適用于大多數(shù)樣本,而母乳樣本可能需要稀釋1:50000。
對于產(chǎn)生校準曲線范圍外結(jié)果的樣品的絕對定量,取較小值或較大值可能需要稀釋。如果不確定樣品水平,則在之前用一個或兩個代表性樣品進行連續(xù)稀釋強烈建議運行整個板。
為了制備1:20稀釋的樣品,將20µL樣品轉(zhuǎn)移到380µL 1X稀釋劑中。這樣可以得到1:20的稀釋度。混合非常為制備1:50000稀釋的樣品,將5µL樣品轉(zhuǎn)移至495µL 1X稀釋劑中。這給你一個1: 100稀釋。充分混合。然后,將2µL的1X稀釋劑轉(zhuǎn)移至998µL,稀釋1:100的樣品。對樣品進行1:50000稀釋。在每個階段充分混合。
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