蛋白質巰基亞硝基化(S-nitrosylation)是一種典型的氧化還原依賴的蛋白質翻譯后修飾,這種修飾是一個非酶的可逆的過程,主要依賴于蛋白質與擴散性一氧化氮的接近度。正如一氧化氮水平被激素敏感性一氧化氮合酶嚴格調節一樣,S硝基化也可以被激素調節。實際上,一氧化氮合酶刺激相互作用蛋白的S-亞硝化,依次交換S-亞硝基并將修飾轉移到靶蛋白上的選擇位點。在數百個實例中,S-亞硝化可以調節細胞蛋白的功能,通常通過酶活性位點中的功能性半胱氨酸的瞬時失活。受影響的酶類包括代謝酶,半胱氨酸蛋白酶,磷酸酶和離子通道。
鑒于S-亞硝化在細胞調節中的廣泛作用,高效快速的S-亞硝化蛋白檢測試劑盒就非常重要。S-亞硝基化蛋白檢測試劑盒#10006518基于生物素轉換原理,將-SNO轉化為S-C-生物素,再通過檢測生物素來表征-SNO。該試劑盒使用簡單方便用時短,樣品可直接用于WB檢測,在Nature Cell Biology等高分雜志上有過引用。
當然,它的小伙伴S-nitrosylated蛋白檢測相關試劑——如生物素標記的探針:S-nitrosylated (SNO) proteins結合探針P NATL ACAD SCI USA和Methods: A Companion to Methods in Enzymology等雜志上都有過引用。
Biotin-HPD是一種巰基反應性生物素化試劑,形成可逆的二硫鍵。它用于標記蛋白質半胱氨酸和其他含有巰基的底物。Biotin-HPDP也用于生物素開關技術中標記S-亞硝基化(SNO)蛋白質,將SNO基團還原為硫醇。標記有生物素的化合物與鏈霉親和素偶聯珠親和地相互作用,熒光團、酶等。Biotin-HPDP與含有巰基的底物的相互作用很容易在ph6.5到7.5的緩沖液(如PBS)中進行。在抗生物素和底物之間形成的二硫鍵可以稍后被還原劑(如二硫蘇糖醇)切割。
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