詳細介紹
商品介紹:
規格:50ul 100ul 200ul
產品分類:抗體 / 一抗
中文名稱 環指蛋白125抗體
英文別名 T cell RING activation protein 1; E3 ubiquitin protein ligase RNF125; Ring finger protein 125; RNF 125; T cell ring protein identified in activation screen; TRAC 1; TRAC1; RN125_HUMAN.
標記: Unconjugated
抗體來源: Rabbit
抗體類型: Polyclonal
免疫原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human TRAC1/RNF125
蛋白細胞定位: 細胞漿
純化方法: affinity purified by Protein A
亞型 IgG
性狀: Liquid
濃度: 1mg/ml
儲存液: 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件: Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
研究領域: 細胞生物 免疫學 信號轉導 表觀遺傳學
背景資料: The RING-type zinc finger motif is present in a number of viral and eukaryotic proteins and is made of a conserved cysteine-rich domain that is able to bind two zinc atoms. Proteins that contain this conserved domain are erally involved in the ubiquitination pathway of protein degradation. TRAC-1 (T-cell RING activation protein 1), also known as RNF125 (ring finger protein 125) or E3 ubiquitin-protein ligase RNF125, is a 232 amino acid novel E3 ubiquitin ligase that functions as a positive regulator in the T-cell receptor signaling pathway. Expressed predominantly in lymphoid tissues such as spleen, thymus and bone marrow, TRAC-1 has been found to inhibit patho-induced cytokine production and down-regulates HIV replication.
交叉反應:Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
RNF125抗體 | RNF125 | GOY-01K0536 |
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
公司產品僅用于科研建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區別,就在于抗體能與相應抗原發生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統、激發補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與免疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
一抗和二抗的區別:
第一抗體就是平常所說的抗體,即能和抗原特異性結合。
第二抗體是能和抗體結合的,即抗體的抗體。主要用于檢測抗體的存在。
一抗是針對抗原的抗體,二抗是針對一抗的抗體。即抗體也可以充當抗原刺激機體產生抗體。也就是說,抗原進入機體刺激機體免疫系統產生免疫應答,由B細胞可以產生與相應抗原發生特異性結合的特殊蛋白質。
一抗二抗都是一種可以特異結合別的物質的基團,而且一抗可以至少結合兩種其他基團(底物和二抗)。
一抗:可以特異結合底物,就是識別出我們想要檢測的東西。一抗和底物結合與否用肉眼是看不出來的。
二抗:可以和一抗結合,并帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),作用是檢測一抗。 如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記(如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團),則不需要二抗。但這樣成本很高,因為一種一抗只識別一種底物。所以如今的設計一般是二抗帶上可檢測標記,再來檢測一抗。而一抗識別底物。這樣,當一抗結合到底物上,就可以通過二抗檢測出來。
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抗原抗體反應影響因素:
(一)反應物自身的因素
抗體:不同來源的抗體,反應性各有差異,抗體的濃度、特異性和親和力都影響抗體抗原反應,為提高試驗的可靠性,應選擇高特異性、高親和力的抗體作診斷試劑.等價帶的寬窄也影響抗原抗體復合物的形成,單克隆抗體不適用于沉淀反應.
抗原:抗原的理化性狀、分子量、抗原決定簇的種類及數目均可影響反應結果.顆粒性抗原出現凝集反應,可溶性抗原出現沉淀反應,單價抗原與相應抗體結合不出現沉淀現象.
(二)反應環境條件
酸堿度:抗原抗體反應必須在合適的pH環境中進行.蛋白質具有兩性電離性質,因此每種蛋白質都有固定的等電點.抗原抗體反應一般在pH6~9進行,有補體參與的反應pH為7.7.4,pH過高或過低都將影響抗原與抗體反應.
溫度:在一定范圍內,溫度升高可加速分子運動,抗原與抗體碰撞機會增多,使反應加速.一般為15℃~40℃,常用的抗原抗體反應溫度為37℃,溫度如高于56℃,可導致已結合的抗原抗體再解離,甚至變性或破壞.每種試驗都有其的最適反應溫度要求.此外,適當振蕩也可促進抗原抗體分子的接觸,加速反應.
電解質:抗原與抗體發生特異性結合后,雖由親水膠體變為疏水膠體,若溶液中無電解質參加,仍不出現可見反應.為了促成沉淀物或凝集物的形成,常用0.85%NaCl或各種緩沖液作為抗原及抗體的稀釋液.