詳細介紹
細胞實驗步驟:
一、細胞復蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;
2.預熱培養(yǎng)基;
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
4.將凍存細胞從液氮罐中取出;
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中;
8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;
9.1000r/min,離心5min;
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;
11.吸棄上清液;
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內,補加適量培養(yǎng)基,輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻,并做好標記;
13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài);
14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性:
產品名稱 | 2BS 細胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 1*125ml/500ml |
英文名稱 | 2BS | 貨號 | GOY-XP4797 |
產品介紹
2BS細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持2BS細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。
本產品中已包含2BS細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于2BS細胞的培養(yǎng)。
產品主要成分
MEM 基礎培養(yǎng)基 445 mL
特級胎牛血清 50 mL
運輸和保存
運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個月;?
注意事項:
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質,請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部;這部分有害物質的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。
細胞培養(yǎng)步驟:
?細胞復蘇?:
從液氮罐中取出凍存細胞,迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后,將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中,輕輕搖動使細胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞換液?:
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液,輕輕漂洗細胞,以去除懸浮在細胞表面的碎片,重復幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細胞傳代?:
當細胞長到80%~90%時,進行傳代。
吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液,加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液,輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘,觀察細胞變化。當細胞間隙增大后,加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細胞使其成為懸液,轉移到離心管中離心。
棄上清,加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中,補加新鮮培養(yǎng)基。
做好標記,放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
選擇對數生長期的細胞進行凍存。
將細胞轉移到離心管中離心,棄上清。
加入適量的凍存液(如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO),輕輕吹打重懸細胞。
將細胞轉移到冷凍保存管中,標記后放入程序降溫盒,再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。
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C2重組人 C2 / Complement Component 2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白
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