人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：人小梁網(wǎng)細(xì)胞RNAHTMC miRNA5 μg CFPAC-1(人胰腺癌細(xì)胞) 小鼠肺腺癌細(xì)胞系;LA795 HUVEC-c pre-screened 預(yù)選型正常人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC) 500,000cells 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells 人原代膽囊上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 大鼠原代腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng)。

 

注意事項(xiàng)

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線(xiàn)手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫(xiě)上細(xì)胞名稱(chēng)、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml，浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿(mǎn)異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

白血病抑制因子受體(LIFR)重組蛋白 Recombinant Leukemia Inhibitory Factor Receptor (LIFR)

CAMK2B Protein Human 重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CPA2重組小鼠 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein

IL6ST Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL6ST / gp130 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EPHB2重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 Protein

大鼠白介素12(IL-12)試劑盒 ，英文名： IL-12 ELISA Kit

Rabbit basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)試劑盒

ELISA 小鼠瘦素(mouse Leptin)  進(jìn)口分裝

CLIAKitforIL-27(MouseIerleukin27)ELISAKit小鼠白介素27

通用型球菌(Staphylococcusaureus)試劑盒20次

ELISAKitPDGF-BB大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB

英文名稱(chēng)：   Total Niic Oxide   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NO

自然殺傷細(xì)胞   英文名稱(chēng)：   Natural killer Cells   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   NK

桿菌抗體   英文名稱(chēng)：   Mycobacterium Tuberculosis Aibody   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TB

谷酰胺   英文名稱(chēng)：   ansglaminase   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   TG

鴨病毒性腸病毒(DEV)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai-pl7-aibody (ai-cailage-Ab) ELISA Kit 人抗軟骨抗體(ai-cailage-Ab)試劑盒

HumanEndotheliallipase,ELELISAKit 人內(nèi)皮脂肪酶(EL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforACSELISAKit大鼠脂酰合成酶

亞甲基藍(lán)(METHYLENEBLUE)復(fù)染試劑盒50次

MouseplateletaibodiesIgG/M/A,PA-IgG/M/AELISAKit小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

生長(zhǎng)分化因子10抗體

人原代主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基SPARC重組小鼠 Osteonectin / SPARC 蛋白 Protein

ANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1 0.5mgANGPTL1/ANG-1 (Angiopoietin-like Protein 1) 血管位蛋白樣1/血管生成素樣蛋白-1抗原

AMPK重組人 AMPK (G1/B1/A1) Heterotrimer 蛋白 Protein

CAMK2B Protein Human 重組人 CAMK2B / CaMKII-beta 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)

CD38 Protein Rat 重組大鼠 SCARB3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

?無(wú)菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線(xiàn)照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染，使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?：定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè)。