詳細介紹
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。 1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。 2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。 3. 細胞傳代 1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次; 2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化; 3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養; 4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。 |
公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
產品名稱 | 晶狀體上皮細胞 |
規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 |
貨號 | GOY-01X1084 |
產品介紹:
名稱 晶狀體上皮細胞 2.組織來源:晶狀體組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發育外胚層,僅含有上皮細胞及其產物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞*分開;因而,晶狀體上皮細胞培養既無神經和血管組織的干擾,又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,保證了培養中細胞成分的單一性。晶狀體上皮細胞主要負責調節晶狀體的生理平衡,包括電解質和液體的輸送。在正常的發育過程中,晶狀體上皮細胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內部,產生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,并最終失去細胞核和其它的細胞器。研究表明,晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調控,包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規則多角形,呈單層生長、連成膜狀。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內表面的單層上皮細胞,其異常增殖和分化與白內障和后囊混濁的發生密切相關,體外培養是研究其生長規律的主要手段。 5.方法簡介: 實驗室分離的人晶狀體上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人晶狀體上皮細胞經BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H127 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
細胞特點及處理:
產品特點: 1、 使用方便:不需昂貴設備。 2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。 3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。 4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。 5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。 6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。 7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。 8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 | 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。 4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
細胞培養技巧:
一、凍存時的注意事項: 1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳 2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。 3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽 滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。 4. 冷凍保存的細胞濃度: 4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml 4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。 4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。 4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。 5. 冷凍保護劑濃度為5 %或10 % DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。
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下列是公司正銷售的產品:
甲型流感 H1N1 (California/04/2009) 神經 (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽
甲型流感 H3N2 (Brisbane/10/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽
甲型流感 H1N1 (Brisbane/59/2007,2008-2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽
甲型流感 H5N1 (Anhui/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽
GFP 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 帶His標簽
GFP 基因全長ORF克隆 (密碼子優化)(表達載體), 無標簽
大鼠 NTRK2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
大鼠 NTRK2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠 VDR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠 IL17A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
晶狀體上皮細胞胰蛋白胨大豆肉湯TSB(1kg) 英文名稱: 產品規格:1kg
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor
乳糖肉湯培養基 英文名稱:Lactose Broth Medium 產品規格:500g
0.312-20 ng/mL 人THAP結構域蛋白4(THAP domain-containing protein 4)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Extracellular calcium-sensing receptor
0.156-10 ng/mL 人基質金屬蛋白26(MMP-26)ELISA試劑盒
1.56-100 nmol/L 甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人脫氧核糖核酸1(Deoxyribonuclease-1)ELISA試劑盒
12.5-800 pg/mL 人速激肽3(Tachykinin-3)ELISA試劑盒
腦心浸液瓊脂(BHIA) 英文名稱:Brain Heart infusion Agar 產品規格:250g