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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 小鼠胸腺淋巴細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1269 |
商品介紹：
名稱 小鼠胸腺淋巴細胞 2.組織來源：胸腺組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 小鼠胸腺淋巴細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體的重要淋巴器官，其功能與免疫緊密相關，是T細胞分化、發育、成熟的場所。其還可以分泌胸腺激素及激素類物質，具內分泌機能的器官。位于胸腔前縱隔。胚胎后期及初生時，是一生中重量相對最大的時期。隨年齡增長，胸腺繼續發育；此后胸腺逐漸退化，淋巴細胞減少，脂肪組織增多。胸腺的結構表面有結締組織被膜，結締組織伸入胸腺實質把胸腺分成許多不*分隔的小葉。小葉周邊為皮質，深部為髓質。皮質不*包圍髓質，相鄰小葉髓質彼此銜接。皮質主要由淋巴細胞和上皮性網狀細胞構成，胞質中有顆粒及泡狀結構。網狀細胞間有密集的淋巴細胞。胸腺的淋巴細胞又稱為胸腺細胞，在皮質淺層細胞較大，為較原始的淋巴細胞。中層為中等大小的淋巴細胞，深層為小淋巴細胞。從淺層到深層為造血干細胞增殖分化為小淋巴細胞的過程。皮質內還有巨噬細胞，無淋巴小結。髓質中淋巴細胞少而稀疏，上皮性網狀細胞多而顯著。形態多樣，胞質中有顆粒及泡狀結構，為其分泌物，尚有散在的圓形的胸腺小體。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠胸腺淋巴細胞采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為1×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠胸腺淋巴細胞經過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M197 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 Prostasin / PRSS8 (aa 30-289) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Thyroid peroxidase / TPO (257 Ser/Ala, 725 Pro/Thr) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL3 / interleukin 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 NEK3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
RNASET2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TPP1 / CLN2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
GM2A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠胸腺淋巴細胞羅丹明B ≥99.0% (HPLC) 2-氯-4-氟吡 98%INS(Human Insulin) ELISA Kit 人胰島素
羅丹明B 分析標準品，>99.0% (HPLC) 3-氯-2-氟吡 98%Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽
紅熒烯 99%4-氯-3-氟吡 95%HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺
海藻酸鈉 AR，90%2-基-5-氟吡 98%Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺β
乙炔化鈉,二甲苯溶液 18 wt%二甲苯溶液2-基-3,5-二氟吡 98%LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體
琥珀酰氯 96%3-氯-5-(三氟甲基)苯 97%PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人龍
L-乳酸鈉 98%2-氯-5-硝基三氟甲苯 98% LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦素
化四苯砷 97%2-氯-4-甲基三氟甲苯 98%LR/Ob-R(Human Leptin receptor) ELISA KIT 人苗條素受體
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