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BT-474 BT474 (乳腺導(dǎo)管癌細胞)

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更新時間:2025-02-21 11:50:15瀏覽次數(shù):374

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0040 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
BT-474 [BT474] (乳腺導(dǎo)管癌細胞) 的相關(guān)*:58316-41-9柴胡皂甙 B2 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
骨碎補 規(guī)格: 1g
53947-92-5補骨脂寧 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
112-80-1油 規(guī)格: 20mg
501-94-0酪; 對羥基; 4-羥基 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
115909-22-3格洛甙C 規(guī)格: HP

詳細介紹

產(chǎn)品介紹:

名稱    BT-474 [BT474] (乳腺導(dǎo)管癌細胞)

別稱Bt-474; BT474

種屬人類

年齡(性別)女性,60

組織來源乳腺導(dǎo)管癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態(tài)上皮細胞樣

背景描述BT-474 [BT474]細胞是由E·LasfarguesW·G·Coutinho從一個實心的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌中分離到的細胞株。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基RPMI-164010μg/ml Insulin2mM L-glutamine20% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~84-100小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in Amsterdam/IMR rats with regression in 10 days. Yes, in nude mice.

注意事項1BT-474細胞生長緩慢,細胞主要是成片生長; 2、匯合至80%即可傳代,細胞不會長太滿,5-6天傳代一次。

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

BT-474 [BT474] (乳腺導(dǎo)管癌細胞)

規(guī)格

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X0040

細胞特點及處理:

產(chǎn)品特點:

1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時的注意事項:

1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

4. 冷凍保存的細胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml

5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

 

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

淋巴細胞抗原6復(fù)合物基因座A(Ly6a)免疫試劑盒*直銷

蛋白二硫化物異構(gòu)A3(PDIA3)免疫試劑盒進口、分裝

脂肪酸結(jié)合蛋白4(FABP-4)免疫試劑盒*直銷

小鼠脫氫表雄酮(DHEA)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠阿立新A(Orexin A)免疫試劑盒*直銷

slit同源物2(果蠅)(SLIT2)免疫試劑盒進口、分裝

綿羊生長激素(GH)免疫試劑盒*直銷

兔信號肽,CUB域,EGF樣1(SCUBE1)免疫試劑盒*直銷

彈性蛋白2,中性粒細胞(ELA2)免疫試劑盒進口、組裝

自然抗性相關(guān)巨噬細胞蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒進口、分裝

BT-474 [BT474] (乳腺導(dǎo)管癌細胞) 2 ug pTYB 1 pTYB 1 低溫運輸,-20℃保存

50次 柱式凍存血液DNAout Column Frozen Blood DNAOUT 常溫

2 ug psiSTRIKE psiSTRIKE 低溫運輸,-20℃保存

BL瓊脂培養(yǎng)基 BL Agar Medium 250g

1000U  Thrombin From Bovine Plasma -20℃保存

50T 致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10mg Hoechst 33258干粉 Hoechst 33258 Powder -20℃干燥避光保存

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