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小鼠直腸平滑肌細胞

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更新時間:2025-02-20 16:06:48瀏覽次數:280

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X0849 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
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細胞脂質過氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
組織脂質過氧化氫(H2O2)活性比色法定量檢測試劑盒 20次

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

小鼠直腸平滑肌細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X0849

商品介紹:

名稱    小鼠直腸平滑肌細胞 

2.組織來源:直腸組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

小鼠直腸平滑肌細胞分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,最下端變細接。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。直腸的動脈血供主要是來自腸系膜下動脈的直腸上動脈,來自髂內動脈的直腸中動脈和來自髂內動脈的直腸下動脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動中基本的運動方式;腸炎時由于平滑肌特殊肌動蛋白的增加導致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動蛋白可能影響收縮力的產生,這進一步證明了炎癥時的腸平滑肌細胞具有可塑性。利用腸平滑肌細胞的培養,可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結締組織對平滑肌細胞的反應。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠直腸平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠直腸平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-M042

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態成纖維細胞樣

傳代特性可傳3代左右

消化液0.25%胰蛋白酶

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 USH1C 基因全長ORF克隆

小鼠 XIAP / BIRC4 基因全長ORF克隆

小鼠 PDGFB 基因全長ORF克隆

小鼠 PTPN2 / TC-PTP 基因全長ORF克隆

小鼠 DDC 基因全長ORF克隆

小鼠 XPNPEP1 基因全長ORF克隆

小鼠 CDK2 轉錄變體2 基因全長ORF克隆

小鼠 MCAM 基因全長ORF克隆

小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆

小鼠 LAMP2 基因全長ORF克隆

小鼠直腸平滑肌細胞0.625-40 ng/mL 大鼠肥大細胞蛋白Ⅱ(Mcpt2)ELISA試劑盒

PEA瓊脂 英文名稱:HB7035 產品規格:250g

0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 15

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Plectin

缺陷假單胞菌培養液(SLB肉湯) 英文名稱:SLB Broth 產品規格:250

0.312-20 ng/mL 脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 4

0.312-20 U/mL 人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Amiloride-sensitive amine oxidase [copper-containing]

改良V-P培養基 英文名稱:V-P Medium,Modified 產品規格:250g

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