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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
| 大鼠尿道上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X0941 |
商品介紹：
名稱 大鼠尿道上皮細胞 2.組織來源：尿道組織 3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介： 大鼠尿道上皮細胞分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。尿道上皮細胞主要功能：①尿道上皮細胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細胞組成；②上皮細胞組成膀胱的防御系統與病原體接觸，它們具有多種防御機制來阻止病原體粘著，保持泌尿器溶解物的不滲透性；③膀胱上皮細胞表達雌激素α、β受體，上皮生長因子受體和纖維母細胞生長因子受體，在損傷和感染時，這些受體對膀胱上皮細胞起著重要作用；④能釋放許多細胞因子、免疫系統介質。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠尿道上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠尿道上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R070 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 RAC2 基因全長ORF克隆
大鼠 KRT14 基因全長ORF克隆
大鼠 SRI 基因全長ORF克隆
大鼠 SFR1 基因全長ORF克隆
大鼠 NAPA 基因全長ORF克隆
大鼠 GNPDA1 基因全長ORF克隆
大鼠 GTPBP5 基因全長ORF克隆
大鼠 PPT2 基因全長ORF克隆
大鼠 PLBD1 基因全長ORF克隆
大鼠 G6PC 基因全長ORF克隆
大鼠尿道上皮細胞0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒
大豆酪蛋白消化物瓊脂培養基USP 英文名稱：Tryptose Soya Broth 產品規格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Parvalbumin alpha
0.39-25 ng/mL 人解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)ELISA試劑盒
抗生素檢測培養基II 英文名稱：Antibiotic Agar No.2 產品規格：250g
15.6-1000 pg/mL 前列腺素E2(Prostaglandin E2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人五聚素3(PTX3)ELISA試劑盒
培養基（蛋白胨水） 英文名稱：Indole Medium 產品規格：10g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2
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