詳細介紹
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
產品屬性:
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
結腸癌組織源細胞 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | GOY-01X1111 |
商品介紹:
名稱 結腸癌組織源細胞 2.組織來源:結腸癌組織 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 人結腸癌組織源細胞分離自患有結腸癌病人的結腸癌組織;結腸癌是常見的發生于結腸部位的消化道惡性腫瘤,好發于直腸與乙狀結腸交界處,以40~50歲年齡組發病率最高,男女之比為2~3:1。發病率占胃腸道腫瘤的第3位。結腸癌主要為腺癌、黏液腺癌、未分化癌。大體形態呈息肉狀、潰瘍型等。結腸癌可沿腸壁環行發展,沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤,除經淋巴管、血流轉移和局部侵犯外,還可向腹腔內種植或沿縫線、切口面擴散轉移。慢性結腸炎患者、結腸息肉患者、男性肥胖者等為易感人群。人結腸癌組織源細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。人結腸癌組織源細胞在生物醫藥領域有不可替代性作用。 5.方法簡介: 實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化、經Percoll離心純化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的人結腸癌組織源細胞經檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 培養基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H137 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ITK Kinase 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ITK Kinase 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD34 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD34 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
GPC6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD55 / DAF 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD55 / DAF 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD84 / SLAMF5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
CD84 / SLAMF5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
S6K / RPS6KB1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
結腸癌組織源細胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C4b-binding protein beta chain
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dipeptidase 1
15.6-1000 pg/mL 人心肌肌鈣蛋白T()ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 呼吸道合胞病毒(RSV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hexokinase-3
78-5000 pg/mL 人多藥耐藥相關蛋白9(MRP9)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Lutropin-choriogonadotropic hormone receptor
1%NaCl阿拉伯糖 英文名稱: 產品規格:20支
BAT培養基 英文名稱:BAT Medium 產品規格:250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proton-associated sugar transporter A