通常，如果懷疑細胞有支原體污染，可直接取細胞上清進行支原體PCR檢測。因為存在支原體污染的細胞上清中，支原體密度為通常為10^6-10^8個/ml，已足以用于PCR檢測。
Minerva公司生產(chǎn)的支原體PCR試劑盒靈敏度高，特異性好，檢測的支原體種類多，很受用戶的歡迎。
但有時，支原體檢測前，還需對樣品中的支原體DNA進行提取。那么，什么時候需要提取呢？
崢嶸歲月，初心不改
當(dāng)出現(xiàn)以下幾種情況時，建議大家在進行支原體qPCR前，先進行提取支原體提取。
1、細胞培養(yǎng)液中存在抑制PCR的物質(zhì)，這時就需要提取。細胞培養(yǎng)基中的血清濃度如果超過12%，那么對下游的PCR反應(yīng)會產(chǎn)生抑制。酚紅，對熒光定量PCR的檢測也會干擾。這些均可以通過使用Miverva公司的支原體DNA提取試劑盒來克服。
2、對于樣品類型是細胞團、疫苗、凍存細胞和石蠟包埋的組織，也需要提前提取DNA。
3、另外，如果樣品中蛋白含量高于10mg/ml，則先需要用蛋白酶K進行處理。
好物推薦
Minerva
Venor®GeM Sample Preparation Kit
貨號：56-1010
該試劑盒可從細胞上清和生物制品中分離支原體DNA，全程只需30分鐘。該試劑盒符合歐洲藥典規(guī)范。
分四步組成：
細胞溶解
DNA特異性與層析柱結(jié)合
祛除殘留的污染物和抑制劑
洗脫DNA。
需要注意的是，常規(guī)細菌和哺乳動物細胞的DNA提取試劑盒是否能用于支原體DNA提取，值得懷疑。因為如果都提取出來，則會對下游PCR檢測帶來干擾。總之，提取后的DNA應(yīng)具有一定的純度和產(chǎn)率
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
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