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dNTP 溶液 ,10mM5mL*

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更新時間:2017-02-09 19:50:57瀏覽次數:339次

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dNTP 溶液 ,10mM5mL*運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存, 有效期為一年。

dNTP 溶液 ,10mM5mL*使用方法:
1. 以 30 uL 的標準 PCR 反應體系為例,如果反應體系不是 30 uL,各成分需要等按比例增加或減少。在一干凈的 PCR 管中,加入下列成分:易錯 PCR Mix, 10× 3 uL 易錯 PCR dNTP, 10× 3 uL MnCl2, 5 mM 3 uL 自備 DNA 模板(10ng/uL) 1 uL PCR 引物(自備,10 uM each) 10 pmol each Taq DNA 聚合酶(5U/uL) 1 -5 U 補水到 30 uL
2. 按已經優化的 PCR 條件進行一定循環數的 PCR(循環數與突變率的關系見下表),然后取 5 uL 電泳檢查。如果沒有優化的 PCR 條件,一般可以先嘗試下面的 PCR 條件: PCR 前變性 94℃ 3 分鐘易錯 PCR 94℃ 1 分鐘 45℃ 1 分鐘 循環 30 次(見注) 72℃ 1 分鐘注:易錯 PCR 一般不需要熱啟動,也不需要在 PCR 結束后做延伸處理。
3. 電泳檢測是否得到預計長度的 PCR 產物。

dNTP 溶液 ,10mM5mL*產品及特點:
易錯 PCR(error-prone PCR)是利用 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校對功能的特性,在一定條件下(如不同的 dNTP 濃度、Mg 濃度和 MnCl2存在)能夠按較高的機率引入隨機引入突變。如果有適當的選擇方法,則可從構建的突變庫選出所需突變體。易錯 PCR 和常規 PCR 的比較如下:本產品就是專門為廣大的研究工作者進行易錯 PCR 而開發,本產品具有下列特點:
1. 即開即用,十分簡單方便,尤其在生物制藥和酶學研究領域顯示出了它的*性。
2. 配方經過精心優化,突變率穩定,突變沒有趨向性。易錯 PCR 的突變率為 0.66% (±0.13%),詳見使用手冊疑難解答。
3. 比體內基因突變更快捷簡單,但如果在 PCR 引物中設計位點,則可使產物克隆到表達載體,也可以用于體內蛋白活性的篩選。
4. 可用于連續易錯 PCR(sequential error-prone PCR),只需把上一次易錯 PCR 的產物用作下一次易錯 PCR 的模板即可,使每一次獲得的小突變累積而產生重要的有益突變。
5. 只適用于擴增 1kb 以下的產物,對于 1kb 以上的產物,建議分段擴增。 
產品介紹:

規格及成分:

pEcoli-6xHN-GFPuv(pEcoli6xHNGFPuv)(60908-2555)
pESC-URA(pESCURA)(60908-2754)y
pET-41a(+)(pET41a)(60908-2807)y
pET28-SBP-TEV(pET28SBPTEV)
pFA6a-3HA-TRP1(pFA6a3HATRP1)
pFL26
pGADT7-T (pGADT7T)(60908-3470)
pGEX-KG(pGEXKG)(60908-3850)
pGL4.42[luc2P HRE Hygro]
PhageScript藤黃微球菌 Micrococcus luteus
苜蓿中華根瘤菌
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2gersion
屎腸球菌 Enterococcus faecium
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
人臍靜脈平滑肌細胞
MA, 小鼠星形膠質細胞 Mouse
宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
側耳 Pleurotus sp.
小鼠表皮角化細胞*培養基100mL
微白色放線菌轉換變種 Actinomyces albidus
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
康寧木霉
人食管上皮細胞*培養基100mL
Ca Ski, 人宮頸細胞
phrGFP-1 (Vitality)(phrGFP1 )
pIEx-5(pIEx5)
pJ4omega
pK18mobSacB(60908-4395)
pLA7

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