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美德聲嗜堿性粒細胞活化檢測試劑

美德聲提供的Flow CAST® 基于流式細胞術的嗜堿性粒細胞活化檢測試劑。

Flow CAST® 是一種體外診斷測試，用于定性評估嗜堿性粒細胞在特定過敏原刺激下的活化情況。該測試旨在輔助即時型過敏的診斷，并與其他實驗室測試聯合使用。

適用范圍

本產品僅供實驗室使用。

檢測原理

Flow CAST® 是一種嗜堿性粒細胞活化測試（BAT），通過在患者全血中體外刺激嗜堿性粒細胞，然后利用流式細胞術測定嗜堿性粒細胞的活化狀態，從而再現過敏反應。

Flow CAST® 用于通過流式細胞術測定患者全血樣品中的嗜堿性粒細胞活化。我們獨te的標記物組合 – CCR3 和 CD63 – 將 CCR3 檢測嗜堿性粒細胞的簡單設門特性與經過驗證的活化標記物 CD63 的可靠應用合二為一。由于其簡單的方案和智能標記組合，可以在一小時內獲得第一個結果 - 為常規實驗室提供wan美的條件。

·       細胞染色：使用兩種熒光標記的單克隆抗體進行染色，抗CCR3-PE用于細胞選擇，抗CD63-FITC用于確定活化狀態。

·       細胞識別：通過CCR3陽性/低側向散射（SSClow）門控識別嗜堿性粒細胞，并通過CD63表達評估其活化狀態。

·       結果讀取：以CD63陽性嗜堿性粒細胞占所有嗜堿性粒細胞的百分比（%CD63）作為讀數。

結果解讀

截斷值

·       技術截斷值：5%，通過參考范圍研究確定。

·       過敏原特異性截斷值：提高特異性的截斷值（詳見CAST®過敏原手冊）。

臨床性能

11項同行評審研究證實了其在區分過敏性疾病患者和非過敏個體方面的有效性。過敏狀況通過患者的臨床病史、口服食物挑戰、實驗室測試（如皮膚點刺試驗和特異性IgE）或這些方法的組合進行驗證。

性能特征

·       嗜堿性粒細胞回收率：>500個嗜堿性粒細胞/管

·       實驗室內精密度：<25%變異系數（CV），根據CLSI指南EP05-A3和ISO標準15197:2013執行

·       重復性：<25%變異系數（CV），根據CLSI指南EP05-A3和ISO標準15197:2013執行

IgE非應答者比例低于5%

在一項針對130名健康獻血者的研究中，只有1人對FcERI受體交聯反應較差，非應答率為0.77%。大多數獻血者（81.5%）表現出強烈反應，活化率超過50%。

每套試劑盒的樣本數量

預分析

樣本要求

·       樣本類型：DTA全血

·       儲存條件：2-8°C（不可冷凍）

·       處理時間：48小時內處理，藥物過敏原需在24小時內處理

采集

·       使用K-EDTA靜脈穿刺管，至少裝滿一半

·       對于大多數常用的抗組胺藥，在規定濃度下未檢測到干擾，詳見使用說明書（IFU）。

處理后樣本的儲存

按照標準協議處理的細胞已固定，固定細胞可在2-8°C下儲存5天以供后續獲取。

設備

·       配備488 nm（藍色）激光源的流式細胞儀，帶有PE和FITC通道的發射濾光片

·       水浴或培養箱（37°C）

·       離心機

CAST® 過敏原

需單獨訂購，請參閱過敏原手冊

制備

·       用250μl刺激緩沖液重懸過敏原

·       每瓶過敏原最多可進行4次刺激

·       使用新鮮復溶的過敏原進行刺激

樣本制備布局

為每位患者準備單獨的試管用于對照和待檢測的過敏原：

·       PB=患者背景

·       PC1=抗FcE（epsilon糖蛋白）RI Ab刺激對照

·       PC2=fMLOP刺激對照

·       A1-1=過敏原1稀釋度1

·       A1-2=過敏原1稀釋度2，以此類推

刺激和染色

向每個試管中加入：

1.       50 μl刺激物

2.       100 μl刺激緩沖液

3.       50 μl全血

4.       20 μl染色劑
輕輕混合并孵育

紅細胞裂解

向所有試管中加入2.0 ml預熱的（18-28°C）裂解試劑
在18-28°C下孵育5-10分鐘，并以500xg離心5分鐘
加入300 μl含固定劑的洗滌緩沖液重懸細胞沉淀
根據所使用的流式細胞儀進行調整

獲取樣本

在流式細胞儀上獲取樣本，或在光保護下孵育30分鐘后固定，2-8°C儲存以供后續獲取，最多可儲存5天

訂購代碼

FK-CCR 100次測試

CE0123

我們的用戶

美德聲提供的產品廣泛應用于各類臨床實驗室，公共衛生中心實驗室，CDC疾病控制中心實驗室等需要高質量檢測單位。

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美德聲誠聘專業代理商，專注渠道支持信譽優異！