01 什么是酶聯免疫吸附測定？
酶聯免疫吸附測定（Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay，ELISA），是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發展起來的一種免疫酶技術。自上世紀70年代初問世以來，發展迅速。
ELISA是基于抗原-抗體的特異性結合反應建立起來的一種快速檢測技術， 它將酶促反應的高效率和免疫反應的高度專一性有機地結合起來，可對各種微量有機物含量進行測定。
抗原、抗體小知識
抗原決定簇示意圖
抗原是能在機體中引起特異性免疫應答的物質。抗原進入機體后，可刺激機體引起細胞免疫和產生抗體。抗原的反應性取決于抗原決定簇。一個抗原分子可帶有不同的決定簇。
抗原抗體結合反應示意圖
抗體是指能與抗原特異性結合的免疫球蛋白。
抗原抗體的關系就如同特定的鑰匙和鎖，一一對應，只有找到正確的鑰匙--抗原才能打開對應的鎖---抗體。
02 酶聯免疫吸附試驗原理
1、使抗原或抗體結合在固相載體表面，并保持活性。
2、使抗體或抗原與某種酶連接成酶標記抗體或抗原。
3、在測定時，把受檢抗體（或抗原）和酶標抗原（或抗體）按不同步驟與固相載體表面的抗原（或抗體）一起反應。
4、采用洗滌的方法去除未結合的酶標抗原（或抗體），最后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質的量成一定的比例。
5、加入酶反應的底物后，底物被酶催化變為有色產物。
6、產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，可以根據顏色反應的深淺來進行定性或者定量分析。
03 酶聯免疫吸附試驗分類
間接法（Indirect ELISA)：
將已知抗原吸附于固相載體，酶標記二抗
檢測待測液體中未知抗體
雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）：
將已知抗體吸附于固相載體，酶標記一抗
檢測待測液體中的可溶性抗原
競爭法（Competitive ELISA）：
將已知抗體或抗原吸附于固相載體，酶標記抗原或抗體
檢測待測液體中的可溶性抗原或抗體
04 酶聯免疫吸附試驗的優勢
1、檢測速度快：可以制備成相應檢測試劑盒，多樣品同時檢測，大大縮短檢測時間。
2、特異性強：其利用抗原與抗體的特異性結合測定，具有選擇性高的特點。
3、靈敏度高：結果的準確性和方法的靈敏度與儀器分析方法一致。
4、操作簡單：不需要大型儀器設備，試劑盒可以直接處理，不需要二次加工。
5、便于推廣：對試驗人員的技術要求不高，便于技術推廣。
05 酶聯免疫吸附試驗的應用
由于酶聯免疫法具有快速、操作方便、靈敏度高的特點，適用于現場檢測，其應用范圍也在不斷擴大，目前已被廣泛應用于食品檢測和醫學檢測中。在食品檢測中主要用于檢測植物性食品的農藥殘留、動物性食品的獸藥殘留、真菌毒素、食源性微生物及食品中特殊蛋白質、重金屬等。
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