液相色譜儀系統主要由貯液瓶、泵、進樣器、柱子、柱溫箱、檢測器、數據處理系統組成。對于整個系統而言,柱子、泵和檢測器是核心部件,同時也是易出問題的主要部位。液相色譜技術是近期發展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離、分析技術.它既能用于微量組分的分析測定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,應用范圍已超過其它各種分離方法。
液相色譜是目前應用zui多的色譜分析方法,液相色譜系統由流動相儲液體瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄器組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。HPLC的輸液泵要求輸液量恒定平穩;進樣系統要求進樣便利切換嚴密;由于液體流動相粘度遠遠高于氣體,為了減低柱壓液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。HPLC應用非常廣泛,幾乎遍及定量定性分析的各個領域。
液相色譜儀系統開機或者更換色譜柱時,柱壓過高是常出現的問題。色譜柱壓過高的原因有兩種:
1、色譜柱本身的原因。主要表現在:長期使用受樣品污染造成區域堵塞,而引起柱壓過高.或者柱子在裝填或運輸過程中受物理振動造成填料松動,等柱子本身的問題。
2、柱壓過高很多常不是色譜柱本身的問題,而是色譜儀器或者液體管路,流動相等外部原因引起的。
當遇到液相色譜儀系統柱壓過高時,我們應該怎么解決呢? 首先應該排查出引起柱壓過高的原因,而不應武斷的把問題的原因怪罪在色譜柱的問題上主要步驟有:
1.拆去保護預柱,看柱壓是否還高,否則是保護柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
2.把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;
3.將柱子的進出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱子,(此時不要連接檢測器,以防固體顆粒進入流動池)。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;
4.更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質,正是這些雜質將篩板堵塞引起壓力上升。