半制備/制備型液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
半制備/制備型液相色譜柱是液相色譜儀上分離樣品的一款關鍵的產品與耗材,使用次數增多時,會出現柱效下降,峰高降低,峰寬加大或者肩峰狀況。 一般的使用者可能會馬上更換色譜柱,其實有些問題可以通過定期的清洗和再生來延長液相色譜柱的使用壽命 。
半制備/制備型液相色譜柱如何提高使用壽命呢?
1、反相色譜柱的沖洗與再生方法:
分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。
2、正相色譜柱的清洗與再生方法
分別用正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇等溶劑做流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的柱體積(異丙醇粘度大,可降低流速,避免壓力過高)。注意使用溶劑的次序不要顛倒,用甲醇沖洗完后,再以相反的次序沖洗至正己烷。所有的流動相必須嚴格脫水。
3、離子交換柱的再生
長時間在緩沖溶液中使用和進樣,將導致色譜柱離子交換能力下降,。用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生,反之,用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
用戶還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的。
如果柱子裝反了,可以調回來,但可能會造成柱內擔體塌陷。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。