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UnipicK +由美國NIH 特別資助NEUROINDX公司開發的新單細胞挑取和組織顯微切割系統。該系統使用保護的脈沖負壓為動力,玻璃毛細管為采集工具,可以實現可靠、并且低成本的單細胞和組織樣品采集。脈沖負壓的強度,持續時間和采集毛細管的直徑可以調節,從而保證采集精度可以到單細胞水平。
儀器的多功能性從單細胞收集到組織顯微切割,包括為單細胞粘附力測量和從固定組織標本(如福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE) 組織)獲取感興趣區域而開發的協議。
這些儀器可以可靠地從納升體積轉移到微升體積,并使用我們專有的通用顯微鏡跨架安裝多種型號的倒置顯微鏡。UnipicK+控制軟件提供直觀且不言自明的程序菜單,以大限度地減少學習過程并促進樣本采集工作流程。該系統與 96 孔工作流程兼容,可用于大多數單細胞分析方案。此外,這些儀器高度適應任何提供可定制采集、分配、分離和洗滌參數的協議。
值得注意的是,所有儀器都可以使用少的耗材 (DCU) 從任何標準培養皿和顯微鏡載玻片中收集,必要時可以重復使用,從而大限度地降低實驗工作的總體成本。
來自世聯博研(北京)科技有限公司的陳寶華介紹,該技術的主要優勢和特性包括:
(1)既可以采集細胞培養,微流芯片,也可以采集組織切片,一機多用。
(2)該系統和倒置顯微鏡配合使用,用戶可以在顯微鏡的觀察下,根據細胞的形態、位置或熒光標記,病理學染色等,采集感興趣的樣品,用戶控制要采集的樣品。
(3)可以從貼壁培養細胞,懸浮培養細胞中采集單細胞,和從三維培養中采集單個多細胞團。還可以從微流芯片上采集單細胞。采集細胞時對細胞活性影響輕微,使得采集的細胞可以用于后續再培養。
(4)系統還可以從用不同方法制備的組織樣品中分離單細胞和亞解剖區域,包括新鮮冷凍組織,蔗糖固定的組織和新鮮活組織。另外,該系統還可以切割采集厚達500 微米的組織切片,適合于需要大量樣品的分析,比如蛋白組學研究等。
(5)UnipicK 系統采集過程溫和,不涉及輻射、熱、激光和化學等處理,樣品不需要特殊處理,可以獲得更高品質的RNA,DNA或蛋白質樣品,可廣泛用于下游眾多的現代分子生物學技術,包括定量RT-PCR、全基因表達、表觀遺傳學和蛋白質組學研究等。
(6)UnipicK 系統既可以安裝在奧林巴斯 CKX41/51IX73/83型號的倒置顯微鏡上,也可以安裝在可以調節高度和寬度的通用支架上,從而兼容實驗室現有的大部分型號倒置顯微鏡,用戶不需要另外采購顯微鏡,節省了使用者的成本。
(7)系統通過控制負壓的強度和持續時間,和選擇使用不同內徑的采集毛細管(5-120微米,或根據客戶要求定制),從而使采集精度可達單細胞水平。
(8)系統配備高精度機械移動電機,小移動距離可達1.5微米,保證毛細管精準的定位。
(9)精心設計的程序,使得校準毛細管高的工作位置高效更迅速,易學易用。采集速度達到25個/分鐘。
(10)與激光輔助的微切割系統,微流和流式細胞分選系統相比,價格低,經濟實用,多用途,并且有獨到的特性,性價比更高。
(11)耗材便宜,只有采集毛細管需要從廠商購買,可以在適當清洗和高壓滅菌重復使用,采集成本低。
(12)儀器占地小,結實耐用,不需特別維護,不需后續維護費用。既可作公共儀器,也適合單個實驗室擁有。
UnipicK PLUS (Unipick+)是新的型號,在 UnipicK的基礎上作了很大的改進,更容易操作,在操作和性能上有很大的提升,主要新性能包括:
1、增加了正壓泵,這樣采集到的樣品可以直接吹到下游的容器中,包括細胞培養板和微量離心管。不需要像 UnipicK 那樣,每次必須把采集毛細管取下來,用注射器轉移采集到的樣品,這樣可以節省很多時間;
2、數字式信號控制系統,更,可以顯示毛細管的高度,壓力大小,時間,采集的次數等;
3、觸摸屏控制,所有操作都可以通過觸摸屏 完成,另外配有幾個快捷按鈕,操控更容易;
4、可以計算和顯示采集細胞時用的力,這樣可以比較計算相對的細胞粘附力;
5、改進的采集毛細管指示燈系統,毛細管指示更清晰;
6、添加了可以采集固定過的組織的程序(該功能需要另外配加熱切片的heating stage)。
針對的行業:
癌癥
干細胞研究
神經科學
單細胞生物學
發育生物學
組學(例如基因組學和蛋白質組學)研究
藥學
應用領域:
在癌癥和干細胞研究,神經科學,發育生物學,-組學(例如基因組學和蛋白質組學)研究,藥學,芯片實驗室技術或基礎生物學領域中有許多應用。任何需要隔離單個細胞或獲取亞解剖區域的研究都可以利用我們的產品。以下是一些常見的代表性應用。另外,請參閱我們的示例視頻和代表性出版物。
單細胞生物學:
從培養物中分離單個貼壁細胞;
從培養物中分離稀有細胞;
從 3D 培養物中分離細胞簇或菌落;
單細胞克隆擴增或富集;
將 CTC 與懸浮液隔離或放置在支架上;
從各種生物芯片中分離單細胞;
從腦切片中分離單個細胞;
測量單細胞粘附強度。
組織顯微切割:
對亞解剖區域和單個細胞體的腦組織進行顯微切割;
肺、肝、視網膜、脾、腎等組織的顯微解剖;
組織類器官的顯微切割;
從包括福爾馬林固定石蠟包埋 (FFPE) 組織在內的固定組織中分離感興趣區域 (ROI)。
應用舉例:
1 從貼壁細胞培養物中收集單個細胞
1.1 使用 UnipicK+ 收集和分配單個 3T3 細胞
使用 UnipicK+ 細胞和組織采集系統對單個 3T3 細胞進行代表性收集和沉積。
1.2 使用 UnipicK+ 收集和分配單個 CHO 細胞
從密集的貼壁細胞簇中收集單個細胞。還顯示了通過視覺確認去除單個細胞(沉積)。
1.3 使用熒光兼容細胞和組織采集系統 UnipicK+采集單個 GFP SH-SY5Y
所有儀器都與熒光兼容,可用于從培養物或組織中輕輕采集單個細胞。
1.4 使用 UnipicK+從異質培養物中采集 IEC-6 細胞
2 組織的顯微切割和單細胞的分離
2.1 使用UnipicK+細胞和組織采集系統解剖海馬 CA3 錐體層。
海馬層和區域可以很容易地被解剖和收集用于下游分析。
2.2 小鼠視網膜顯微切割。
對白鼠視網膜不同層進行顯微切割的準確性。將眼組織切成 12μm 并用甲苯胺藍染色。使用 20μm ID 一次性毛細管單元 (DCU) 進行收集。
2.3 使用我們UnipicK+細胞和組織采集系統收集單個浦肯野細胞。
使用蔗糖沉沒的 10?m 小鼠小腦切片。
2.4 使用 UnipicK+ 對單個浦肯野細胞進行代表性收集和沉積
使用 UnipicK+可以收集直徑約為 15μm 的單個浦肯野細胞的精度。將大鼠小腦切成20μm并用甲苯胺藍染色。使用 15 μm ID 一次性毛細管單元 (DCU) 進行收集。
發表的典型文獻:
1 Karakas HE, Kim J, Park J, Oh JM, Choi Y, Gozuacik D, Cho YK. A microfluidic chip for screening individual cancer cells via eavesdropping on autophagy-inducing crosstalk in the stroma niche. Sci Rep. 2017; 7(1):2050
2 Chen Y, Zheng Y, Gao Y, Lin Z, Yang S, Wang T, Wang Q, Xie N, Hua R, Liu M, Sha J, Griswold MD, Li J, Tang F, Tong MH. Single-cell RNA-seq uncovers dynamic processes and critical regulators in mouse spermatogenesis. Cell Res. 2018; 28: 879-896
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