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Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒Solarbio生產的細胞凋亡熒光Hoechst 33342 /PI 雙染試劑盒為您提供了一種經典而又快速簡便的細胞凋亡與細胞壞死檢測方法。 本試劑盒采用Hoechst 33342和碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)雙染的方法。細胞發生凋亡時，染色質會固縮。Hoechst33342可以穿透細胞膜，染色后凋亡細胞熒光會比正常細胞明顯增強。碘化丙啶(PI)不能穿透細胞膜，對于具有完整細胞膜的正常細胞或凋亡細胞不能染色。而對于壞死細胞，其細胞膜的完整性喪失，碘化丙啶(PI)可以染色壞死細胞。上述兩種染料雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光，壞死細胞為強紅色熒光＋強藍色熒光。參考下圖，左圖為誘導凋亡前的正常細胞，右圖為誘導凋亡后的細胞。
染色快速方便，兩種染料的染色僅需20-30分鐘，一步染色即可完成。 使用方便，使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。 本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數量可以為1×105-1×106。
Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒產品內容：
100T 500T
細胞染色緩沖液 100ml 500ml
Hoechst染色液 0.5ml 2.5ml
PI染色液 0.5ml 2.5ml
說明書 1 份 1 份
使用說明：
1. 每個樣品收集約10-100萬細胞于1.5ml離心管內，離心棄上清。細胞沉淀用0.8-1ml細胞染色緩沖液重懸。
2. 加入5微升Hoechst染色液。
3. 加入5微升PI染色液。
4. 混勻，冰浴或4℃孵育20-30分鐘。
5. 用流式細胞儀檢測紅色熒光和藍色熒光。
6. 如果使用熒光顯微鏡檢測，檢測前離心沉淀細胞，用PBS洗滌一次，再涂片觀察紅色熒光和藍色熒光。對于貼壁細胞使用熒光顯微鏡檢測，可以不收集細胞，直接依次按照上述比例加入細胞染色緩沖液、Hoechst染色液和PI染色液冰浴或4℃染色20-30分鐘。染色后PBS洗滌一次，再在熒光顯微鏡下觀察。
注意事項：
需使用流式細胞儀進行紅色和藍色雙熒光檢測。也可使用熒光顯微鏡檢測。 染色后宜盡快檢測。
Hoechst 33342對人體有害，碘化丙啶(PI)對人體有刺激性，請注意適當防護。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操
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