（1）新玻璃器皿的清洗步驟：先用自來水或肥皂水刷洗干凈，放入洗液中過夜或浸泡幾天，取出用自來水沖洗8至10次。然后，用蒸餾水洗3次，用去離子水（或三蒸餾水）洗2－3次，烤干、包裝、滅菌。

　?。?）橡皮制品的清洗步驟：一般選用白皮橡皮塞，使用前先用自來水洗涮干凈，以后用2％NaOH煮20分鐘，用自來水沖洗5－6次，再用1.3％HCl煮30分鐘，用自來水沖洗5－6次，用蒸餾水洗3次，zui后用去離子水洗，干后包裝滅菌。

　　ATCC細胞計數一般用血球計數板，按白血球計數法進行計數。

　　操作方法如下：

　　1.首先取待稀釋的ATCC細胞懸液1ml加4ml生理鹽水（或Hank液）作5倍稀釋。

　　2.先將特制的蓋玻片放在血球計數板上，使兩側均現帶色牛頓環。用血色素吸管（或ATCC細胞管）取少量待測ATCC細胞懸液，沿蓋玻片邊緩緩滴入，讓其自由滲入，待整個蓋玻片下均充滿ATCC細胞懸液為宜。注意不要使液體流到旁邊的凹槽中。

　　3.在顯微鏡下，用10′10的倍數進行計數，所用計數板如圖2所示。

　　4.計數的方法：計算計數板的四角大方格（每個大方格又分16個小方格）內的ATCC細胞數。計數時，只計數完整的ATCC細胞，若聚成一團的ATCC細胞則按一個ATCC細胞進行計數。在一個方格中，如果有ATCC細胞位于線上，一般計上線ATCC細胞不計下線ATCC細胞，計左線ATCC細胞不計右線ATCC細胞，計數誤差不能超過±5％。

　　5.計數的換算：計完數后，需換算出每毫升懸液中的ATCC細胞數。由于計數板中的每體積即為0.0001cm2。故可按下式計算

　　原ATCC細胞懸液ATCC細胞數/ml＝n/4′10000′5（稀釋倍數）

　　n＝四大格內的ATCC細胞總數

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