豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit

豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA Kit必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

培養基 :"*培養基有售，用我們拜力生物的*培養基，細胞培養更省心！"

供應商 :拜力生物

貨期 :7-10天

產品包括ELISA試劑盒和ELISA實驗，生物試劑和化學試劑，抗體，細胞，血清，培養基、儀器、耗材、生化、免疫及細胞培養試劑等，廣泛應用于生命科學基礎研究、生物制藥、疾病診斷與控制、檢驗檢疫、食品衛生等諸多領域。客戶涉及大專院校、研究機構、醫院、衛生防疫、商品檢驗檢疫、生物制藥公司、食品企業等。

1.  試劑準備：所有試劑都必須在使用前達到室溫，使用后請立即按照說明書要求保存試劑。  實驗操作中請使用一次性的吸頭，避免交叉污染。

2.   加樣：加樣或加試劑時，請注意在吸取標本 / 標準品，酶結合物或底物時，前一個孔與后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大，將會導致不同的 “預孵育"時間，從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)好控制在10分鐘內，如標本數量多，推薦使用多道移液器加樣。

3.   孵育：為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜，以避免液體蒸發；洗板后應盡快進行下步操作，任何時侯都應避免酶標板處于干燥狀態;同時應嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。

4.   洗滌：洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干，勿將濾紙直接放入反應孔中吸水，同時要消除板底殘留的液體和手指印，避免影響后的酶標儀讀數。

5.  試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置(如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl)，以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。

6.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化(比如，每隔10分鐘)，如顏色較深，請提前加入終止液終止反應，避免反應過強從而影響酶標儀光密度讀數。

7.  底物：底物請避光保存，在儲存和溫育時避免強光直接照射。

    建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

    如標本中待測物質含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請后乘以稀釋倍數。

◇      液體類標本

標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。

◇      血清：

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      血漿：

應根據試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      尿液、胸腹水、腦脊液：

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。如有沉淀形成，應再次離心。

◇      細胞培養上清：

檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

◇      組織標本：

切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結合物 半抗原反應 半抗原載體結合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細胞質蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細胞裂解 組織提取 重組細胞因子 
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細菌克隆載體 文庫及構建 cDNA文庫 基因組文庫 噬菌體展示文庫
【酶】限制性內切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長基因 RNA cDNA合成 cDNA相關試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產物純化
【RNAi技術】 siRNA 反義寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文庫
【蛋白檢測】 Western印跡 報告基因檢測 蛋白檢測試劑盒
【實驗動物】 轉基因動物 小鼠 大鼠 模式動物
【臨床檢測試劑】 生化檢測 遺傳學檢測 血液檢測
【相關檢驗試劑】 食品安全檢測 藥品安全檢測
【蛋白純化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白穩定
【細胞培養】 血清 血清替代物 細胞培養基 細胞 細胞株 感受態細胞 新鮮細胞分離
【干細胞】 干細胞/祖細胞 原代細胞 干細胞培養基
【蛋白修飾】 蛋白標記 載體蛋白結合 其它
【細胞生物學檢測】 細胞凋亡 細胞分離 細胞增殖
【藥物篩選】 熒光素細胞活力/增殖/毒性檢測
【免疫檢測】 放射性免疫檢測 化學發光免疫檢測

1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致出現錯誤的結果。
2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品,酶結合物或底物時,時間間隔如果太大,將會導致不同的 “預孵育”時間,
從而明顯地影響到測量值的準確性及重復性。而且,洗滌不充分將影響試驗結果。
3. 試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。
6. 中,英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。
7. 所有的樣品都應管理好,按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。
GR-β ELISA實驗方法：
酶聯免疫法/酶免法（ELISA）凡購買目錄本公司ELISA檢測試劑盒可提供代測服務。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存：2-8℃
樣品類型（SAMPLE TYPES）：
標本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清
或血漿。每個標本量收集體積＝100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
樣品采集：
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本，儲存在4℃備用，如有特殊原因需要周期收集標本，
將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時，-20℃可保存1個月。-70度可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

目前，外泌體定量主要通過NTA（納米顆粒追蹤實驗）來實現，應用較多，即通過溶液中顆粒的光散射來測定顆粒的濃度和不同粒徑分布，但不能區分外泌體和微囊泡與其它顆粒的區別，可以通過外泌體和微囊泡質膜染色，通過熒光NTA（fNTA）能夠準確測定溶液中外泌體的濃度；另外，也可以通過流式細胞儀測定外泌體濃度等，這些方法操作復雜，成本較高，需要昂貴的儀器設備。外泌體ELISA（EXO-ELISA），即外泌體捕獲和定量試劑盒，采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附實驗（ELISA）技術，酶標板預包被有抗外泌體表面抗原的抗體，可直接捕獲樣品和標準品中外泌體顆粒，然后加入Biotin標記的檢測抗體，洗滌去除未結合的物質后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素（Streptavidin-HRP），洗滌后，加入顯色底物液TMB，避光顯色。

EXO-ELISA，可簡單、快速捕獲和分離特異的的總外泌體或外泌體亞群，并且通過外泌體標準品，可測定樣本中外泌體的濃度；使用較為方便，既可以檢測同一樣本中外泌體多個蛋白質的表達，又可以篩選大量樣本中某一蛋白質的表達變化。

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