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高效液相色譜儀結構剖析

時間:2023/12/25閱讀:804
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1 、高壓泵

HPLC使用的色譜柱是很細的(1~6mm),所用固定相的粒度也非常小(幾μm到幾十μm),所以流動相在柱中流動受到的阻力很大,在常壓下,流動相流速十分緩慢,柱效低且費時。為了達到快速、高效分離,必須給流動相施加很大的壓力,以加快其在柱中的流動速度。為此,須用高壓泵進行高壓輸液。高壓、高速是高效液相色譜的特點之一。

2 、梯度洗提

類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不能少的部分。

梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提高分離效果。

3 、進樣裝置

(1)注射器進樣裝置:進樣所用微量注射器及進樣方式與GC法一樣。進樣壓力<150×105Pa,當進樣壓力>150×105Pa時,必須采用停流進樣。

(2)高壓定量進樣閥:與GC法用的流通法相似,能在高壓下進樣。

4、色譜柱

色譜柱是色譜儀最重要的部件(心臟)。通常用后壁玻璃管或內(nèi)壁拋光的不銹鋼管制作的,對于一些有腐蝕性的樣品且要求耐高壓時,可用銅管、鋁管或聚四氟乙烯管。

柱子內(nèi)徑一般為1~6mm。常用的標準柱型是內(nèi)徑為4.6或3.9mm ,長度為15~30cm的直形不銹鋼柱。填料顆粒度5~10μm ,柱效以理論塔板數(shù)計大約7000~10000 。

發(fā)展趨勢是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。

5、檢測器

主要包括紫外光度檢測器、光電二極管陣列檢測器、熒光檢測器、差示折光檢測器和電導檢測器。

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