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液相色譜儀進樣前的準備

時間:2021/6/25閱讀:2526
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  HPLC方法建立期間,在第一次進樣前,我們必須有把握所選擇的檢測器能檢測到所有的被測樣品組分。通常可變波長紫外(UV)檢測器,因這種檢測器使用方便,且可用于大多數(shù)樣品。uV光譜信息對方法建立具有舉足輕重的地位,uv光譜數(shù)據(jù)可從文件使用”pdf Fact ory”試用版本創(chuàng)建文獻中查找,也可通過所測樣品成分的化學結構估算;直接測得(如果可拿到化合物純品)或在HPLC分離期間用二極管陣列檢測器(PDA)得到。樣品對uv檢測響應不足時,町考慮使用其它類型檢測器(熒光,電化學等),或衍生化樣品使檢測信號增強。
 

          樣品來源形式不同,可能以如下形式出現(xiàn):
          1.可直接進樣的溶液
          2.需稀釋、pH緩沖、加入內(nèi)標或其它定容操作的溶液
          3.必須首先溶解或提取處理的固體
          4.樣品需預處理以除去十擾物和/或保護色譜柱或儀器不受損害
          可直接進樣的樣品有操作方便、精密度好的優(yōu)點,然而大多數(shù)HPLC分析的樣品需稱重和/或稀釋定容后才能進樣。當樣品溶劑成分接近于流動相時,一般不會產(chǎn)生基線波動等問題,通常能夠得到較好的結果。
          有些樣品在注人HPLC前需進行部分分離(預處理),以除去干擾物、濃縮樣品或消除“柱殺手”,因此了解樣品基質(zhì)和各種被測物的濃度范圍非常重要。許多情況下,建立滿足要求的樣品預處理方法甚至比完成一次良好的HPLC分離更具挑戰(zhàn)性。

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