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有獎互動 | 膜層析新利器,病毒純化 So easy

閱讀:690        發(fā)布時間:2023-5-9

?新型疫苗和疾病療法研發(fā)中的病毒、病毒樣顆粒和病毒載體純化的需求越來越多,因此需要使用更高效的純化技術(shù)。與蔗糖或氯化銫梯度離心相比,離子交換層析法具有諸多的優(yōu)勢:處理量大、病毒產(chǎn)量、純度和感染性更高、處理時間顯著縮短等。


賽多利斯開發(fā)的 Sartobind® 離子交換膜層析技術(shù)因為具有較大孔隙可以讓目標分子通過基質(zhì)進行對流運動,而不是擴散運動。這樣就可以快速捕獲目標(結(jié)合)并洗脫(解離),從而縮短循環(huán)時間。而且這種即用型膜層析的床體積更小,因而其對緩沖液的需求量也更低。產(chǎn)品形式上為了滿足科學家靈活多樣的需求,Vivapure 和 Sartobind® Lab 膜層析產(chǎn)品在設(shè)計之初就考慮到可通過離心、注射器、蠕動泵或 FPLC 系統(tǒng)進行驅(qū)動。

 

基于以上原因,加上 Sartobind® Lab 對病毒顆粒沒有物理截留作用,因此對病毒純化效果非常理想。下面讓我們了解一下Sartobind® Lab 在皰疹病毒以及濃核癥病毒純化中的應用情況:

 

1、使用 Sartobind® Lab S 100 純化皰疹病毒

 

純化條件和步驟見表1。實驗結(jié)果表明,大多數(shù)傳染性偽狂犬病病毒 Kaplan 株 (PrV-Ka)和缺乏糖蛋白 gD (PrV-gD-Pass) 、以及牛皰疹病毒1(BHV-1) 是在 MES 緩沖液中用 400 mM KCl 洗脫后發(fā)現(xiàn)的。且超過 85% 的病毒在單一餾分中被洗脫(表2)。

 

圖片

表1. PrV和BHV-1的純化條件

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表2. 陽離子交換層析后PPrV和BHV-1的收率

 

2、使用 Sartobind® Lab 純化濃核癥病毒

 

陰、陽離子交換層析膜均可以用來結(jié)合病毒顆粒,具體使用哪一種要由進料 pH 決定(表3)。本實驗中Q柱有最佳的純化效果。且結(jié)果顯示,Sartobind® 沒有尺寸排除效應,這表明膜層析柱是捕獲大病毒的不錯之選。

 

表3.Sartobind®Lab Q、D和S的濃核癥病毒結(jié)合能力

 

互動有禮

您認為膜層析純化病毒還有哪些優(yōu)勢呢?趕快留言告訴我們吧!獲點贊最多的三位參與者將會獲得奶茶券一張,截止時間2023年5月10日 12:00。

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下載全文

使用Sartobind® Lab Q 和S
離子交換膜層析進行病毒純化

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