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馬血清在細胞生物學中的關鍵作用
閱讀:97 發布時間:2025-5-19一、馬血清:不只是營養源,更是細胞功能的“調控者"?
血清是細胞培養基中不可-或缺的添加物,為細胞提供營養、生長因子、激素及貼壁因子。與胎牛血清相比,?馬血清(Horse Serum, HS)?具有以下特性:
1.成分差異?:
生長因子譜不同?:馬血清中表皮生長因子(EGF)、胰島素樣生長因子(IGF)含量較高,而胎牛血清富含成纖維細胞生長因子(FGF)。
激素濃度較低?:適合對激素敏感的細胞(如某些神經元或干細胞)。
免疫球蛋白含量低?:減少免疫反應干擾,適用于疫苗生產或病毒培養。
2.物理特性?:
粘度較低?:便于細胞懸浮培養及顯微操作。
脂蛋白含量適中?:減少脂毒性風險,支持長期培養。
二、馬血清的核心應用場景?
1. 特定細胞類型的“專屬營養液"?
神經元細胞培養?:
馬血清中的神經營養因子(如BDNF)和低激素環境,可促進神經元突觸生長并維持電生理活性,常用于海馬神經元或背根神經節細胞培養。
昆蟲細胞培養?:
用于桿狀病毒表達系統時,馬血清能顯著提高重組蛋白產量,且不易形成沉淀,優于胎牛血清。
干細胞誘導分化?:
在間充質干細胞(MSCs)向成骨或成脂分化時,馬血清可提供更穩定的微環境,避免胎牛血清中未知成分的干擾。
2. 病毒培養與疫苗開發?
馬血清的低抗體水平減少了對病毒的中和作用,常用于流感病毒、狂犬病毒等的擴增,提高病毒滴度。
3. 特殊研究需求?
代謝研究?:馬血清的代謝物譜與胎牛血清差異顯著,適用于比較不同血清對細胞代謝的影響。
倫理替代方案?:部分研究為規避胎牛血清的倫理爭議(如胎兒采集),轉而選擇馬血清。
三、馬血清 vs. 胎牛血清:如何科學選擇?
參數 | ?馬血清(HS) | ?胎牛血清(FBS)? |
生長因子 | EGF、IGF-1豐富 | FGF、PDGF豐富 |
適用細胞類型 | 神經元、昆蟲細胞 | 干細胞 常規哺乳動物細胞(如HeLa)
|
免疫干擾? | 低 | 較高(含IgG) |
成本 | 低于FBS | 較高 |
?
四、馬血清使用實操指南?
熱滅活處理?:
多數情況下無需熱滅活(避免生長因子降解);若需滅活補體,56℃水浴30分鐘即可。
濃度優化?:
常規細胞培養:添加5%-10%馬血清。
神經元分化:可提高至15%-20%。
質量控制?:
選擇?內毒素水平低?(<10 EU/mL)的批次;
每批血清需進行?細胞增殖測試?(如CCK-8法)和?無菌驗證?。
儲存條件?:
分裝后-20℃保存,避免反復凍融;
解凍時置于4℃緩慢融化,減少蛋白聚集。
五、注意事項與常見問題?
批次差異?:不同來源的馬血清成分可能存在波動,建議關鍵實驗前進行多批次測試。
替代方案?:對于高敏感性細胞,可嘗試?無血清培養基?或?馬血清與胎牛血清混合使用?。
污染風險?:馬血清需警惕支原體或病毒污染,建議選擇γ-射線輻照處理的商品化產品。