CellWorld無血清快速細胞凍存液的使用方法如下:
凍存管凍存步驟
1.收集細胞:按照常用方法收集懸浮細胞或貼壁細胞于離心管中。貼壁細胞需先用胰酶等消化液消化使其脫離培養瓶壁,然后收集;懸浮細胞可直接收集。
2.計算細胞數:按照培養細胞密度和所用細胞凍存管的尺寸計算所需凍存細胞數,一般細胞密度為(5×10^{5}-5×10^{6}cells/ml)。
3.離心收集細胞:取所需數量的細胞懸浮液于離心管中,以(1000-2000rpm),在(4℃)下離心(3-5)分鐘,離心后移去離心管中的上清液,留下細胞沉淀。
4.重懸細胞:加入適量的CellWorld無血清快速細胞凍存液,使細胞密度達到(5×10^{5}-5×10^{6}cells/ml),緩慢地混合均勻,制成細胞混合液。
5.分裝細胞:將細胞混合液分裝于已標記好的冷凍管中,標記內容包括細胞名稱、凍存日期等重要信息。
6.凍存細胞:將凍存管直接放入(-80℃)冰箱,可長期冷凍保存。若需要液氮保存,第二天可將凍存細胞從(-80℃)冰箱轉移至(-196℃)液氮罐中。
細胞培養板原位凍存步驟
1.吸棄上清:從培養狀態良好的細胞培養板中將培養基上清小心吸取干凈。
2.加入凍存液:加入適量CellWorld無血清快速細胞凍存液于培養孔板中,要充分浸潤細胞。
3.密封培養板:蓋上蓋板,做好密封措施,防止染菌。
4.凍存培養板:直接將含凍存液的細胞培養板放入(-80℃)以下冰箱,長期冷凍保存。
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