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逆轉錄PCR，或者稱反轉錄PCR（reverse transcription-PCR, RT-PCR），是聚合酶鏈式反應（PCR）的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA，再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。由一條RNA單鏈轉錄為互補DNA（cDNA）稱作“逆轉錄”，由依賴RNA的DNA聚合酶（逆轉錄酶）來完成。隨后，DNA的另一條鏈通過脫氧核苷酸引物和依賴DNA的DNA聚合酶完成，隨每個循環倍增，即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解，留下互補DNA。
RT-PCR的指數擴增是一種很靈敏的技術，可以檢測很低拷貝數的RNA。RT-PCR廣泛應用于遺傳病的診斷，并且可以用于定量監測某種RNA的含量。（檢測基因表達的方法，參見Northern Blot法。）
RT-PCR有時候也會指代實時PCR（real-time PCR）。為了與逆轉錄PCR相區別，通常被寫作“定量PCR”（quantitative PCR）或者RTQ-PCR（real-time quantitative PCR）。
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