昆蟲多功能氧化酶(MFO)ELISA試劑盒依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

試劑盒規格及配置  

自備物品

①.酶標儀（450nm）

②.高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

③.37℃恒溫箱

操作步驟

①．從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

②．設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；

③．樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。

④．除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

⑤．棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次   （也可用洗板機洗板）。

⑥．每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

⑦．每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。

結果判斷

繪制標準曲線：在Excel工作表中，以標準品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出標準品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。