更新時間：2018-09-12 09:52:09瀏覽次數：834
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【簡單介紹】
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【詳細說明】
辣根酶化學發光底物試劑盒//VISIGLO HRP PLUS CHEMILUM SUB KIT/N219-KIisa酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。3） 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。elisa溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。elisa 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。如果一抗自己帶有可以被檢測出的標記（如帶熒光、放射性、化學發光或顯色基團），則不需要二抗。機體內B細胞在抗原刺激下所產生的具特異性免疫功能的球蛋白。
辣根酶化學發光底物試劑盒
VISIGLO HRP PLUS CHEMILUM SUB KIT
N219-KIT
1 Kit
COLD
No
IRRITANT
41116104
1 year
Western Blotting & ELISA
Detection-Chemiluminescent
ULTRA PURE GRADE
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elisa試劑配制：Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理，以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據所需的量配置使用，并使用相應的稀釋液配制，不能混淆。請精確配置標準品及工作液，盡量不要微量配置（如吸取檢測溶液A時，一次不要小于10μl），以避免由于不準確稀釋而造成的濃度誤差；請勿重復使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。大分子性是指構成抗原的物質通過是相對分子質量大于10000的大分子物質，分子量越大，抗原性越強。絕大多數蛋白質都是很好的抗原。elisa試劑盒組成及試劑配制：1. 酶聯板：一塊（96孔） 2. 標準品（凍干品）：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,600 pg/ml，將其稀釋為400 pg/ml后，再做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別稀釋成400 pg/ml，200 pg/ml，100 pg/ml，50 pg/ml，25 pg/ml，12.5 pg/ml，6.25 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品：取0.5ml （不要少于0.5ml ） 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。3. 樣品稀釋液：1×20ml。4. 檢測稀釋液A：1×10ml。5. 檢測稀釋液B：1×10ml。6. 檢測溶液A：1×120μl（1:100）臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋，稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制（100μl/孔），實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制。7. 檢測溶液B：1×120μl/瓶（1:100）臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。8. 底物溶液：1×10ml/瓶。 9. 濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 10. 終止液：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。 11. 覆膜：5張12. 使用說明書：1份 抗原是一類能刺激機體免疫系統使之產生特異性免疫應答，并能與相應免疫應答產物（抗體或抗原受體）在體內外發生特異性結合的物質。 elisa實驗不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 （1） 固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據此判明其吸附性能是否良好。
關鍵詞：19-KIT
