對于分光光度計我們應用比較廣泛，但是了解甚少，在此為大家介紹一下分光光度計的有關知識，希望能夠更好的了解以及應用。

分光光度計原理：是利用分光光度法通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度對該物質進行定性和定量分析。

分光光度計主要組成由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統組成。

1.分光光度計按照波長及應用領域的不同可以分為：可見光分光光度計，紫外分光光度計，紅外分光光度計，熒光分光光度計，原子吸收分光光度計。

可見光分光光度計測定波長范圍為400760 nm的可見光區
紫外分光光度計測定波長范圍為200400nm的紫外光區
紅外分光光度計測定波長范圍為大于760nm的紅外光區
熒光分光光度計用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜
原子吸收分光光度計光源發出被測的特征光譜輻射被經過原子化器后的樣品蒸氣中的待測元素基態原子所吸收通過測定特征輻射被吸收的大小來求出被測元素的含量。

不同種類的分光光度計的基本原理相似都是利用一個可以產生多個波長的光源通過系列分光裝置從而產生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后部分光源被吸收通過測量樣品的吸光值經過計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。 

2.分光光度計按自動化程度分類可分:為手動、半自動、自動分光光度計。 

3.分光光度計按軟件可分為:帶掃描、不帶掃描。

分光光度計較為常使用的就是紫外可見分光光度計。

根據紫外可見分光光度計的儀器結構可以分為三類：單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。

1、單光束分光光度計

單光束是指從光源今發出的光，經過單色器等—系列光學元件，通過吸收池，較為后照在檢測器上時，始終為一束光。它只官一束單色光(光束只能交替通過參比溶液、樣品溶液)，一只比色皿，一只光電轉換器。工作時，一條光路，先通過多比溶液，再通過試樣溶液進行光強度的測旦。　　

單光束分光光度計的特點是結構簡單、價格低，主要適用于做定量分析，測量結果受電源的波動影響較大，容易給測量結果帶來較大的誤差。所以，它們在位灼上受到限制。一般來講，要求較高的制藥行業、質量檢驗行加等不適宜使用單光束紫外可見分光光度訃。

2、雙光束分光光度計

雙光束分光光度汁就是有兩束單色光的紫外可見分光光度計。其光路設計基本上與單光束分光光度計相似。區別是在單色器與吸收弛之間加了一個切光器，其作用是以一定的頻率把一個光束交替分為強度相等的兩柬光，使一路通過參比溶液，另一路通過樣品溶液。然后由檢測器交替接收參比信號和樣品信號。接收的光信號轉變成電信號后，由前置放大器放大，并進一步解調、放大、補償等，較為后由顯示系統顯示。

3.雙波長分光光度計采用兩個單色器，可以同時得到兩柬波長不同的單色光，其光路. 光源發出的光被兩個單色器分別分離出波長為4：和4z的單色光，通過切光器，將兩束光以一定的時間間隔交替照射到裝有樣品試液的同一個吸收池，由檢測器顯示出試液在波長4?和42的透射比或吸光度。雙波長分光光度計不僅能測量高濃度試樣、多組分混合試樣，而義測定混濁樣品時比單波長測定更靈敏、更有選擇性。雙波長測定時，兩個波長的光通過同一吸收池，pJ以消除因吸收他的參數不同、位置不同、污垢以及制備參比溶液等帶來的誤差，從而可以顯著地提高測定的準確度。

單光束分光光度計：由一束經過單色器的光，輪流通過參比溶液和樣品溶液，以進行光強度測量，主要適于做定量分析。

雙光束分光光度計：以兩束光一束通過樣品、另一束通過參考溶液的方式來分析樣品的分光光度計。這種方式可以克服光源不穩定性、某些雜質干擾因素等影響，還可以檢測樣品隨時間的變化等。 

雙光束分光光度計操作規程

1.接通電源，打開雙光束分光光度計開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。

2.將靈敏度開關調至“1”檔（若零點調節器調不到“0”時，需選用較。）

3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使空白管對準光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態下調節零點調節器，使讀數盤指針指向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調節“100”調節器，使空白管的t=100，指針穩定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色完畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

【應用范圍】

可廣泛應用于生命科學、化工、制藥、質量檢驗、環境保護等方面

【注意事項】

為了防止光電管疲勞，不測定時必須將試樣室蓋打開，使光路切斷，以延長光電管的使用壽命。

取拿比色皿時，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，而不能碰比色皿的光學表面。

比色皿不能用堿溶液或氧化性強的洗滌液洗滌，也不能用毛刷清洗。

比色皿外壁附著的水或溶液應用擦鏡紙或細而軟的吸水紙吸干，不要擦拭，以免損傷它的光學表面。

分光光度計已經成為現代分子生物實驗室常規儀器，應用也是比較廣泛。在此這里介紹的分光光度計的知識是由上海旦鼎貿易有限公司整理編輯，如有需要轉載敬請說明，謝謝！