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當前位置：上海聯碩生物科技有限公司>>技術文章>>Trizol法提取總RNA的流程及原理
提取原理：
Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解，從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性，但它不能抑制RNA酶的活性，因此Trizol中還加入了8－羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（即RNA酶）。
Trizol試劑是直接從細胞或組織中提取總RNA的試劑。在樣品的裂解液或勻漿中，Trizol能保持RNA的完整性。加入氯/仿(CHCl3)后離心，樣品能分成水樣層和有機層。而RNA存在于水樣層中。在收集上面的水樣層后，RNA可以通過異丙醇沉淀的方法來還原。在除去水樣層之后，樣品中的核酸和蛋白也能相繼以沉淀的形式還原。乙醇沉淀能析出中間層的DNA，在有機層中加入異丙醇能析出有機層的蛋白。
Trizol試劑不但可用于小量樣品（組織：50-100mg；細胞：5×106），也可用于大量樣品（組織≥1g或細胞≥107），對動物、植物、細菌、血液提取都適用，可同時處理大量不同樣品。反應迅速，提取的總RNA沒有DNA和蛋白質污染，可用于Northernblot、RT-PCR、RNase保護分析等。
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