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ELISA試劑盒實驗操作中常見問題明細(xì)

時間:2014-9-23閱讀:993
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血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA試劑盒各個操縱步驟的留意要點,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存。可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留。  
ELISA試劑盒的操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測標(biāo)本。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器,使加液過程迅速完成。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。的試劑,良好的儀器和準(zhǔn)確的操縱是保證ELISA試劑盒檢測結(jié)果正確可靠的必要條件。ELISA頂用的蒸餾 水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清 、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。

E-(Hu)(01)-00167 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒  ,英文名: ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit  ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00168 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)ELISA試劑盒  ,英文名: granulocyte specific antinuclear antibody,GS-ANA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00169 人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒 ,英文名: Blocking antibody,BA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00170 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒 ,英文名: ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit  ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00171 人抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-neutrophil granules antibody,ANGA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00172 人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA試劑盒  ,英文名: anti-apolipoprotein A1 antibody,Apo A1 ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00173 人抗胰島素受體抗體(AIRA)ELISA試劑盒  ,英文名: anti-insulin receptor antibody,AIRA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00174 人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒  ,英文名: anti-centrol and centrosome antibody,ACA ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00175 人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒  ,英文名: anti-albumin antibody,AAA ELISA Kit ,ELISA試劑盒規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00176 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體(CCP)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-cyclic citrullinated peptide,CCP ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T
E-(Hu)(01)-00177 人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒 ,英文名: anti-perinuclear factor,APF ELISA Kit ,規(guī)格: 96T/48T

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