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ELISA試劑盒技術運用

時間:2014-7-1閱讀:945
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利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。
ELISA試劑盒規格為:96T/48T     
保存溫度:2~8°  
適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

ELISA試劑盒技術中的抗原與抗體的反應
抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為 IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈是相同的,有κ(kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結構不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu )鏈。
重鏈和輕鏈的 N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區,分別用VH和VL表示。兩者構成抗體的抗原結合部位,只與相應的抗原決定簇匹配,發生特異性結合,是抗體專一性結合抗原的結構基礎。
IgG可被木瓜蛋白酶分解為三個區段,其中兩個相同的區段稱抗原結合片段(Fab)。每個Fab都保存結合抗原的能力,但只有一個抗原結合位點,是單價的,與抗原結合后不出現凝集或沉淀。另一區段稱Fc段,無抗體活性,但具有IgG*的抗原性。
IgG可被胃蛋白酶分解為兩個片段,一個Fab雙體,稱F(ab')2,能和兩個相同的抗原結合;另一片段類似Fc,隨后被分解成小分子多肽,無生物活性。
IgM是由五個單體組成的五聚體,含 10個重鏈和10個輕鏈,具有10個抗原結合價,由于空間位置的影響,只表現為五個抗原結合價。IgM分子量約為900000,IgG分子量約為150000。
機體被微生物感染后,先產生IgM抗體,然后產生IgG抗體。經過一段時間,IgM抗體量逐漸減少而消失,而IgG抗體可長期存在,在疾病*后可持續數年之久。
IgM抗體一般為保護性抗體具有免疫性。因此IgM抗體的測定,對某些傳染病如甲型肝炎有較高的臨床診斷價值。 

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