分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復雜的光，分解為光譜線的儀器。測量范圍般包括波長范圍為380~780 nm的可見光區和波長范圍為200~380 nm的紫外光區。不同的光源都有其有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的380~780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后，可得到由紅、橙、黃、綠、藍、靛、紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
原理
分光光度計采用個可以產生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產生定波長的光源，光線透過測試的樣品后，分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時，被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比，其關系如下式:
A=-lg(I/I。)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I。為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程，即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
物質對光的選擇性吸收波長，以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區，除某些物質對光有吸收外，很多物質本身并沒有吸收但可在定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應用標準品或對照品同時操作。
操作方法
1.接通電源，打開儀器開關，掀開樣品室暗箱蓋，預熱10分鐘。
2.將靈敏度開關調至"1"檔(若零點調節器調不到"0"時，需選用較。)
3.根據所需波長轉動波長選擇鈕。
4.將液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內，使管對準光路。
5.在暗箱蓋開啟狀態下調節零點調節器，使讀數盤針向t=0處。
6.蓋上暗箱蓋，調節"100"調節器，使管的t=100，針穩定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。
7.比色畢，關上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。
注意事項
1.該儀器應放在干燥的房間內，使用時放置在堅固平穩的作臺上，室內照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風，防止燈泡燈絲發亮不穩定。
2.使用本儀器前，使用者應該了解本儀器的結構和作原理，以及各個操縱旋鈕之能。在未按通電源之前，應該對儀器的安性能行檢查，電源接線應牢固，通電也要良好，各個調節旋鈕的起始位置應該正確，然后再按通電源開關。
3.在儀器尚未接通電源時，電表針于"0"刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲行調節。
