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超級(jí)微波固相多肽合成(UE-SPPS)為多肽藥物帶來(lái)無(wú)限可能!

檢測(cè)樣品:多肽藥物

檢測(cè)項(xiàng)目:多肽合成

方案概述:UE-SPPS 技術(shù)通過(guò)在反應(yīng)環(huán)境中直接中和過(guò)剩的活化氨基酸單體以及精確控制去保護(hù)基的蒸發(fā),達(dá)成了無(wú)需任何洗滌過(guò)程的目標(biāo)。這項(xiàng) 技術(shù)相較于傳統(tǒng)的 SPPS 方法,能夠減少多達(dá) 95% 的廢物產(chǎn)生。

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更新時(shí)間2024年05月24日

上傳企業(yè)培安有限公司

下載方案

超級(jí)微波固相多肽合成(Ultra-Efficient Solid Phase Peptide Synthesis,UE-SPPS)代表著肽生產(chǎn)領(lǐng)域的一次革命性突破,它完荃摒棄了傳統(tǒng)固相肽合成中不可或缶夬的樹(shù)脂洗滌環(huán)節(jié)。這項(xiàng)技術(shù)通過(guò)在反應(yīng)環(huán)境中直接中和過(guò)剩的活化氨基酸單體以及精確控制去保護(hù)基的蒸發(fā),達(dá)成了無(wú)需任何洗滌過(guò)程的目標(biāo)。此外,所有反應(yīng)步驟,包括偶聯(lián)反應(yīng)和去保護(hù)反應(yīng),均在經(jīng)過(guò)優(yōu)化的微波輻射下進(jìn)行,大大提升了肽和蛋白質(zhì)(即使是長(zhǎng)達(dá) 100 個(gè)氨基酸的序列)的合成質(zhì)量。UE-SPPS 技術(shù)相較于傳統(tǒng)的 SPPS 方法,能夠減少多達(dá) 95% 的廢物產(chǎn)生。有關(guān)這項(xiàng)創(chuàng)新技術(shù)的詳細(xì)討論已發(fā)表于《自然通訊》雜志。請(qǐng)?jiān)谏戏健跋螺d方案”中查看。


UE-SPPS 代表了肽合成技術(shù)的重大飛躍,目前這項(xiàng)技術(shù)已在 CEM 公司的 Liberty Blue 2.0 和 Liberty PRIME 2.0 系統(tǒng)上得到應(yīng)用。歡迎探索 UE-SPPS 背后的益處與技術(shù)精髓:


超髙純度  Exceptional Purity


頂空氣體沖洗技術(shù)1

638521445090822704577.jpg                    

1. 微波加熱促使 Fmoc 去保護(hù)反應(yīng)完荃進(jìn)行。

2. 氮?dú)猓∟2)流入反應(yīng)器中。

3. 去保護(hù)基通過(guò)微波加熱蒸發(fā)。

4. 氮?dú)猓∟2)和去保護(hù)基一同流出反應(yīng)器,進(jìn)入廢液。

5. 剩余的試劑和副產(chǎn)物被過(guò)濾至廢液中


簡(jiǎn)而言之,清潔的反應(yīng)環(huán)境帶來(lái)了更純凈的合成產(chǎn)物。


CEM 公司專(zhuān)有的頂空氣體沖洗技術(shù)能夠在去保護(hù)基在反應(yīng)器上部表面凝結(jié)之前,有效清除反應(yīng)頂部的揮發(fā)性去保護(hù)基。去保護(hù)基的凝結(jié)和(常常不合時(shí)宜的)反應(yīng)液重新進(jìn)入反應(yīng)環(huán)境會(huì)嚴(yán)重影響合成產(chǎn)物的純度,這在長(zhǎng)序列合成中尤為關(guān)鍵,因?yàn)榧词故俏⒘康碾s質(zhì)也可能迅速積累,影響最終產(chǎn)品的質(zhì)量。


彳切底排除反應(yīng)溶液和頂部空間中的去保護(hù)基帶來(lái)了額外的好處:它消除了復(fù)雜且重復(fù)的容器清洗環(huán)節(jié)。

ue-spps-jr-10-mer.jpg

JR 10-mer


CarboMAX 偶聯(lián)2    


當(dāng)合成純度至關(guān)重要時(shí),選擇合適的偶聯(lián)策略也同樣關(guān)鍵。


碳二亞胺促進(jìn)的偶聯(lián)方法在許多方面優(yōu)于磷鹽促進(jìn)的偶聯(lián)(例如 HBTU/DIEA)方法,特別是在較高溫度下更是顯著。碳二亞胺方法的優(yōu)勢(shì)包括大幅降低烯醇化和差向異構(gòu)化的反應(yīng)速率,以及減少其他基于堿催化的副反應(yīng)的發(fā)生。

ue-spps-carbomax-coupling_1.jpg

R = Amino Acid Side Chain
Y = Side Chain Protecting Group
A = OH, NH


CarboMAX™ 是 CEM 公司針對(duì)標(biāo)準(zhǔn)碳二亞胺肽偶聯(lián)方法的升級(jí)改進(jìn)版。這一創(chuàng)新技術(shù)常規(guī)實(shí)現(xiàn)超越傳統(tǒng)碳二亞胺方法的偶聯(lián)效率和更低的差向異構(gòu)化率。點(diǎn)擊此處獲取更多詳情。





Crude Purity                
Peptide                Sequence                Standard                CarboMAX                
Thymosin                SDAAVDTSSEITTKDLKEKKEVVEEAEN                63%                75%                
GRP                GRPVPLPAGGGTVLTKMYPRGNHWAVGHLM                62%                74%                
Bivalirudin                fPRPGGGGNGDFEEIPEEYL                80%                82%                
1-34PTH                SVSEIQLMHNLGKHLNSMERVEWLRKKLQDVHNF                67%                85%                
35-55MOG                MEVGWYRSPFSRVVHLYRNGK                77%                91%                
Magainin 1                GIGKFLHSAGKFGKAFVGEIMKS                71%                79%                
Dynorphin A                YGGFLRRIRPKLKWDNQ                74%                82%                
Liraglutide*                HAEGTFTSDVSSYLEGQAAK(γ-Glu-palmitoyl)EFIAWLVRGRG-OH                74%                88%                
















*Synthesized with ~ 0.32 mmol/g Fmoc-Gly-Wang PS resin

微波能量3

ue-spps-microwave-energy.jpg

每一步都實(shí)現(xiàn)更優(yōu)的反應(yīng)轉(zhuǎn)化。


微波輻射技術(shù)在提升固相肽合成所制肽段的純度方面已經(jīng)是一項(xiàng)成熟的技術(shù),并在全球范圍內(nèi)的眾多出版物中得到了描述。作為微波 SPPS 領(lǐng)域的全球令頁(yè)導(dǎo)者,CEM 于 2003 年推出了第壹臺(tái)自動(dòng)化微波肽合成儀。


卓躍效率 Unmatched Efficiency

極大減少浪費(fèi)


減少?gòu)U物的產(chǎn)生,而不是犧牲合成的產(chǎn)量或純度。



通過(guò)使用碳二亞胺促進(jìn)的偶聯(lián)方法,UE-SPPS 工藝省去了偶聯(lián)后的洗滌步驟。偶聯(lián)過(guò)程中任何剩余的活化氨基酸在可能導(dǎo)致副反應(yīng)之前,都會(huì)被隨后加入的去保護(hù)基有效中和。


基于這一原理,UE-SPPS 擴(kuò)展應(yīng)用了“一鍋法”偶聯(lián)和去保護(hù)步驟,在現(xiàn)有的偶聯(lián)溶液中只需加入少量的去保護(hù)溶液,這樣幾乎可以將兩個(gè)反應(yīng)所需的總?cè)軇┝繙p少一半。(也就是說(shuō),偶聯(lián)步驟中的溶劑可以在后續(xù)的去保護(hù)步驟中重新使用。


Traditional SPPS Cycle (Extensive Wash Related Waste)


peptide-workflow-traditional.jpg


UE-SPPS Cycle (No Wash Related Waste)


peptide-workflow-ue-spps.jpg


通過(guò)開(kāi)發(fā)頂部空間氣體沖洗技術(shù)(如前所述的基于蒸發(fā)的過(guò)程),UE-SPPS 同樣去除了去保護(hù)后的洗滌步驟。在超過(guò) 90°C 的溫度下,揮發(fā)性的去保護(hù)基(吡咯烷)會(huì)在快速的微波輔助脫保護(hù)步驟期間迅速?gòu)姆磻?yīng)器內(nèi)蒸發(fā)。通過(guò)頂空氣體的沖洗,防止了揮發(fā)的去保護(hù)基在反應(yīng)器上部表面的凝結(jié)。這些過(guò)程的結(jié)合使得肽酰樹(shù)脂在無(wú)需洗滌的情況下即可直接進(jìn)入下一次偶聯(lián)反應(yīng)。


通過(guò)方法優(yōu)化、精心選擇試劑以及工程技術(shù)的突破,UE-SPPS 實(shí)現(xiàn)了高達(dá) 95% 的廢物減量,同時(shí)不犧牲合成產(chǎn)率和純度。



Traditional SPPS                UE-SPPS                
Waste per AA addition*                100 mL                < 5 mL                
Waste per 10-mer*                1 L                < 50 mL                







不可否認(rèn)的節(jié)省時(shí)間


更快的合成周期促進(jìn)了更為敏捷的研究和探索。


UE-SPPS 在減少?gòu)U物方面的高效同樣體現(xiàn)在節(jié)約時(shí)間上。通過(guò)采納上述相同的策略性方法優(yōu)化、精選試劑以及工程上的創(chuàng)新,UE-SPPS 還能將合成所需時(shí)間縮減至僅占原來(lái)的 5%,成效卓躍



Traditional SPPS                UE-SPPS                
Time per AA addition*                2 hours                < 4 minutes                
Time per 10-mer*                20 hours                20 hours                





*@ 0.1mmol

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