脂質(zhì)本2000 1.5ml GIBCO11668-019原裝

本公司所有產(chǎn)品均為科研試驗(yàn)用，不能用于臨床！

脂質(zhì)本2000      GIBCO11668-019     1.5ml

【性能參數(shù)】

產(chǎn)品名稱： 脂質(zhì)體2000

英文名稱： Lipofectamine 2000 Reagent

產(chǎn)品貨號(hào)： 11668-027/11668-019

產(chǎn)品規(guī)格： 0.75mL/1.5mL

產(chǎn)品產(chǎn)地： 美國(guó)

產(chǎn)品商標(biāo)： invitrogen 

保存與運(yùn)輸： 4℃

現(xiàn)貨狀態(tài)： 現(xiàn)貨

詳細(xì)資料： 實(shí)驗(yàn)方法技術(shù)資料 

北京方程生物 

脂質(zhì)本2000 1.5ml GIBCO11668-019原裝

Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途轉(zhuǎn)染試劑，可在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中提供高效轉(zhuǎn)染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進(jìn)行基于siRNA和shRNA的基因敲除實(shí)驗(yàn)及基因表達(dá)研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染的*試劑。


采用Lipofectamine 2000試劑，您可以實(shí)現(xiàn)：

在各種細(xì)胞系中具有的轉(zhuǎn)染效率和高重組蛋白表達(dá)水平 (表1)

出眾的siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染性能

在血清存在時(shí)亦具有可靠的轉(zhuǎn)染效率 – 轉(zhuǎn)染后無需更換培養(yǎng)基

適用于高通量應(yīng)用的可靠性能

建立穩(wěn)定細(xì)胞系的*選擇


適用于基因表達(dá)和基因沉默的高性能轉(zhuǎn)染試劑

Lipofectamine 2000試劑適合所有常見細(xì)胞系及許多難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系，可用于含有或不含

血清的培養(yǎng)基。在基因沉默應(yīng)用中，Lipofectamine 2000試劑的高效轉(zhuǎn)染提供了很高的基因敲除水平，

足以獲得令人信服的結(jié)果。Lipofectamine 2000試劑可實(shí)現(xiàn)siRNA和質(zhì)粒DNA的高效轉(zhuǎn)染，它是共轉(zhuǎn)染的

*試劑。Lipofectamine 2000試劑使用方便 – 只需將其與核酸混合，加入細(xì)胞培養(yǎng)物即可。


適合高通量操作

Lipofectamine 2000試劑使用簡(jiǎn)單、快速且具有很高的轉(zhuǎn)染效率，適用于瞬時(shí)蛋白表達(dá)或

高通量RNAi轉(zhuǎn)染。在上述應(yīng)用中，可輕松建立自動(dòng)化或機(jī)器人系統(tǒng)轉(zhuǎn)染條件。如需了解有關(guān)

Lipofectamine 2000的實(shí)驗(yàn)方案、文獻(xiàn)引證及其它產(chǎn)品信息，可登錄細(xì)胞系數(shù)據(jù)庫。


僅供研究使用。不得用于人或動(dòng)物的治療或診斷。

Lipofectamine 2000轉(zhuǎn)染試劑是一種多用途轉(zhuǎn)染試劑，可在各種貼壁和懸浮細(xì)胞系中提供高效轉(zhuǎn)染。

研究人員可使用Lipofectamine 2000試劑進(jìn)行基于siRNA和shRNA的基因敲除實(shí)驗(yàn)及基因表達(dá)研究。

Lipofectamine 2000是Life Technologies提供的用于siRNA和質(zhì)粒DNA共轉(zhuǎn)染的*試劑。


脂質(zhì)體2000 描述

脂質(zhì)體2000是專門用于將核酸轉(zhuǎn)染進(jìn)入真核細(xì)胞的一種形式我們提供下列的建議

在多種細(xì)胞和培養(yǎng)板中都有很高的轉(zhuǎn)染效率。在網(wǎng)上列出的細(xì)胞類型中都獲得了較高的轉(zhuǎn)染效率。 核酸-脂質(zhì)體2000的復(fù)合物可以直接加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中無論是有血清還是無血清的情況。 轉(zhuǎn)染之后不用移除復(fù)合物或者更換培養(yǎng)液但是復(fù)合物應(yīng)在轉(zhuǎn)染后4-6h移除。 轉(zhuǎn)染的一些重要指導(dǎo) DNA轉(zhuǎn)染使用page3 我們建議使用Opti-MEM I reduced serum  培養(yǎng)基來稀釋脂質(zhì)體2000和核酸。 轉(zhuǎn)染時(shí)不要向培養(yǎng)基中加入抗生素。 在實(shí)驗(yàn)過程中要保持一樣的條件  

DNA轉(zhuǎn)染 使用下列方法

在24孔板內(nèi)轉(zhuǎn)染DNA進(jìn)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞。對(duì)于其他的板子可以參考page4.所有的數(shù)量和體積都是基于一個(gè)孔的劑量。準(zhǔn)備復(fù)合物使DNAug脂質(zhì)體ul的比例為1:2到1:3。轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度較高可以獲得高的效率高的表達(dá)水平以及使毒性降低。條件的選擇很重要。

1. 貼壁細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前一天向24孔板內(nèi)接種0.5-2*105個(gè)細(xì)胞使得細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時(shí)融合率達(dá)到90-95%。切記使用不含抗生素的培養(yǎng)基。

2. 對(duì)于每一個(gè)轉(zhuǎn)染樣品按照如下方法準(zhǔn)備復(fù)合物 A 使用無血清的培養(yǎng)基將DNA稀釋為50ul溫和混勻。 B 使用前混勻脂質(zhì)體2000然后用培養(yǎng)基將一定量的脂質(zhì)體2000稀釋為50ul。室溫孵育5min。 進(jìn)行到c時(shí)間不超過25min     C5min的孵育后混合稀釋的DNA和稀釋的脂質(zhì)體2000總體積為100ul。溫和混勻室溫孵育20min溶液呈現(xiàn)云霧狀.混合物在室溫可穩(wěn)定存在6h。

3. 向含有細(xì)胞和培養(yǎng)液的板子中每孔加入100ul的復(fù)合物通過敲打板子和來回晃動(dòng)使其混合均勻。

4. 細(xì)胞孵育18-48h后可檢測(cè)轉(zhuǎn)染情況。培養(yǎng)液可在轉(zhuǎn)染4-6h后更換。

5. 對(duì)穩(wěn)定的細(xì)胞系傳代細(xì)胞在轉(zhuǎn)染后以1:10的比例加入新鮮的培養(yǎng)液。第二天加入選擇培養(yǎng)基。  優(yōu)化轉(zhuǎn)染 為了獲得高的轉(zhuǎn)染效率和低毒性通過調(diào)整細(xì)胞濃度和DNA:脂質(zhì)體2000的比例來優(yōu)化轉(zhuǎn)染條件。確保細(xì)胞90%的融合以及DNA(ug)脂質(zhì)體ul比例在1:0.5到1:5。   轉(zhuǎn)染條件的浮動(dòng)   轉(zhuǎn)染到不同類型的培養(yǎng)板中脂質(zhì)體2000的核酸的量細(xì)胞數(shù)以及合適的培養(yǎng)基量都在下表中顯示。在96孔板中建議總體積到50ul

Gibco 16140-07

Gibco 12664-025胎牛血清，間充質(zhì)干細(xì)胞，澳洲源Fetal Bovine Serum, Mesenchymal Cell Qualified, Australia Origin 500MLGibco12676-011胎牛血清，熱滅活活性炭處理，美國(guó)源Fetal Bovine Serum, charcoal stripped, USDA-approved regions 100ML

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