小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒
- 公司名稱 上海橋杜商貿有限公司
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- 產地 國產/進口
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2016/8/13 22:38:15
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人及各種動物elisa試劑盒，細胞株，進口抗體，實驗外包技術服務，普通PCR、熒光定量PCR、Western印跡、流式、ELISA、免疫組化、細胞培養、MTT、放免、實驗動物飼養及造模等
中文名稱：小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒
英文名稱：Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit
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小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒用途：
本試劑盒僅供科研使用，定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ） 含量。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒原理:
采用雙抗體夾心法測定小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）水 平。用純化的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）抗體包被微孔板，制成固相載體，實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品，并加入HRP標記的抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色，再用硫酸終止反應，轉變成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）含量呈正相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度（OD值），根據標準曲線，計算測試樣品中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）濃度。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ） 試劑盒組成及保存：
| 試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
| 說明書 | 1份 | 1份 | |
| 封板膜 | 2片（48） | 2片（96） | |
| 密封袋 | 1個 | 1個 | |
| 酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | |
| 標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 終止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
| 濃縮洗滌液 | （20ml×20倍）×1瓶 | （20ml×30倍）×1瓶 | 2-8℃保存 |
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ） 試劑盒 樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。
仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。
2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。
5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2
6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒操作步驟：
1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在*、第二孔中分別加標準品100μl，然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒數據計算：
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，即為樣品的實際濃度。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）elisa試劑盒保存條件及有效期：
1.試劑盒保存：2-8℃
2.有效期：6個月
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