小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒
- 公司名稱 上海橋杜商貿有限公司
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- 型號
- 產地 國產/進口
- 廠商性質 代理商
- 更新時間 2016/8/13 22:38:15
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人及各種動物elisa試劑盒,細胞株,進口抗體,實驗外包技術服務,普通PCR、熒光定量PCR、Western印跡、流式、ELISA、免疫組化、細胞培養、MTT、放免、實驗動物飼養及造模等
中文名稱:小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒
英文名稱:Mouse Peroxisome Proliferator-activated receptor γ,PPAR-γ ELISA Kit
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小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒用途:
本試劑盒僅供科研使用,定量檢測細胞液、體液、組織、血清、血漿等標本中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 含量。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒原理:
采用雙抗體夾心法測定小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)水 平。用純化的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)抗體包被微孔板,制成固相載體,實驗時依次在微孔板中加入樣本及標準品,并加入HRP標記的抗體,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,反復洗滌后加底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化為藍色,再用硫酸終止反應,轉變成黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)含量呈正相關。采用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),根據標準曲線,計算測試樣品中小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)濃度。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 試劑盒組成及保存:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ) 試劑盒 樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。
仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒操作步驟:
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒數據計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,即為樣品的實際濃度。
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)elisa試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃
2.有效期:6個月
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