標準品內毒素的檢測方法及其應用概況內容

研發中心，凝聚了一批以博士、碩士為業務骨干，本科以上學歷占 95% 以上的專業研發和生產隊伍，擁有完整的抗原、抗體、ELISA試劑盒、膠體金試紙條、生物傳感器、細胞工程、酶工程、基因工程等技術的研發和生產平臺，目前開發出的獸藥殘留快速檢測試劑盒（例：克倫特羅檢測試劑盒、氯霉素檢測試劑盒、硝基呋喃類檢測試劑盒）、動物疾病診斷試劑（例：豬弓形蟲抗體檢測試劑盒、豬藍耳病檢測試劑盒、豬瘟病毒檢測試劑盒）、分子生物學工具酶、綠色水產藥品等等一系列的產品已在國家機關、企業、科研單位廣為應用。

自從1968 年 L ev in 和 Ba ng 建立鱟血細胞溶解物試驗 （ L AL T est） [ 6] 以后, 很快引起了 美國 F DA 的關注, 1973 年 1 月 12 日發表通告  , 聲明鱟試 劑屬 于生物制品, 是一種檢測細菌內毒素存在的靈敏指示劑, 標準品可用于醫藥品生產中間過程的細菌內毒素污染的檢測。此后經多位學 — 212 — 者在分子 水平對鱟血 細胞溶解 物（ L ） 復雜成 分進行的 研究, 闡 釋了凝聚 的詳細機 制: 內毒 素在鈣、 鎂二價陽 離子的參 與下, 首 先激活鱟試劑凝 固酶系統 的 C 因 子, zui后 將凝固蛋 白原變成凝 固蛋白。

3 細菌內毒素檢測的方法自980 年美國藥典第 20 版收載細菌內 毒素試驗（ bacter io l 德國藥典、意大利藥典、 endot ox ins test . BET ） 以來, 英國 藥典、 歐洲藥典、日本藥局方、 中國藥典等相繼收載了該方法。中國藥 典 1995 年版擬收載了 12 種藥品進行細 菌內毒素檢查。而 1995 年 美國藥典第 23 版收載了 471 種藥品進行細菌內毒素檢查, 因 此, 我 國須加緊對 更多的品種 進行研究以 逐步代替 致熱原檢查 （ pyr o gen lest ） 。近十余年 來, 細菌內 毒素試驗的方 法已取得很 大 進 展, 目 前 有 凝 膠 法 （ G el—clott echique ） , 比 濁 法 （ T ur bidmet ric assay ） , 比 色法 （ Color imet ric assay） 和 免疫 學方 法（ Immunolo gy method） 。

3. 1 半定量測定一凝膠法 試管凝膠法已成為細菌內毒素檢查的經典方法。它是根據鱟試劑與細菌內毒素產生凝集反應的機理, 終點判斷采用翻轉180 度的目測法。此法操作較簡單, 經濟, 不需要測定設備, 可在0. 03 EU / ml 的范圍內進行半定量測定。其缺陷為特異性不 強, 精密度、定量性較差。

3. 2 定量測定隨著鱟試驗方法和 測定儀器的不斷完善, 內毒素測定已向微量定量方向發展。定量測定在常規藥品檢查、 生產過程質控、各種除熱原方 法的評價、殊樣品的檢查 （ 如血液、液、特尿腦脊液） 等方面, 與凝膠法相比具有靈敏、快捷、準確的特點。